[发明专利]N-[5-(3,5-二氟-苄基)-1H-吲唑-3-基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-苯甲酰胺的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及N-[5-(3,5-二氟-苄基)-1H-吲唑-3-基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-苯甲酰胺的制备方法。本发明的目的还在于该化合物的新固体形式、它们在治疗由蛋白激酶活性失调引起的疾病中的应用以及含有该化合物的药物组合物。

背景技术

蛋白激酶(PK)的功能失常是很多病的标志。大部分癌基因和原癌基因涉及针对PK编码的人类肿瘤。增强的PK活性也涉及很多非恶性的病，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤病、息肉病、神经纤维瘤病、银屑病、与动脉粥样硬化相关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维化、关节炎、肾小球肾炎和术后狭窄和再狭窄。

PKs还涉及炎性疾病以及病毒和寄生虫的增殖。PK还可在神经变性障碍的发病机制和发展中起到作用。

关于PK功能失常或失调的一般参考文献，参见例如Current Opinion in Chemical Biology，1999，3，459-465；Nature Rev.Drug Discov.2002；和Carcinogenesis，2008，29，1087-1091。

PK的亚组是一组膜受体，其具有内源性蛋白质-酪氨酸激酶活性(RPTK)。通过结合生长因子类，RPTK被激活，并且磷酸化自身和在细胞质中的一系列底物。通过这种原理，它们可以转导增殖的细胞内信号，分化或发生其它生物学变化。在人肿瘤中频繁观察到RTPK的结构异常情况、过表达和活化，其暗示导致细胞增殖的信号转导的组成性激发可以导致恶性的转化。间变性淋巴瘤激酶(ALK)是酪氨酸激酶受体，其属于胰岛素受体RTK的亚家族：ALK基因是位于染色体2，并且主要在神经母细胞瘤、特别是在发展期间中表达的。ALK基因涉及在染色体5上的核磷蛋白(NPM)基因均衡的染色体易位，所述在染色体5上的核磷蛋白(NPM)基因在间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)的大亚组中。在ALK+ALCL中，作为易位的结果，NPM普遍存在的启动因子驱动融合蛋白质的异位表达，在所述融合蛋白质中NPM部分成为二聚物，ALK激酶结构域经受自磷酸化作用而变成组成性激活型。

很多文献数据已显示，NPM-ALK融合蛋白质具有强的致癌潜能，其异位表达负责细胞转化。此外，在小鼠T-细胞淋巴细胞中人NPM-ALK的组成性表达足以在转基因动物中发展淋巴样肿瘤的形成，其具有短时期的潜伏期。

ALCL是已被定义的疾病，其特征是CD30抗原(Ki-1)的表面表达，对应于2％的成人和13％的儿科的非霍奇金淋巴瘤，主要影响年轻男性患者。ALK+ALCL对应于70％的所有ALCL，并且是侵袭性疾病，其具有全身性征兆和频繁的结节外牵涉(骨髓，皮肤，骨，软组织)。

约15-20％的表达ALK的ALCL被发现携带不同的染色体易位，涉及ALK的细胞质部分，具有不同的N-末端部分，全部导致ALK激酶结构域的组成性激活。

此外，从外胚层起源的固体肿瘤例如黑色素瘤、乳腺癌、以及神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤、尤因肉瘤、视网膜母细胞瘤建立的细胞系被发现表达ALK受体。

作为结论，干扰ALK信号可能表示在ALCL中阻断肿瘤细胞增殖的特异性和有效的方式以及其它可能的适应症。

国际专利申请WO2009/013126(Nerviano Medical Sciences Srl.)描述和要求保护游离碱形式的N-[5-(3,5-二氟-苄基)-1H-吲唑-3-基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-(四氢-吡喃-4-基氨基)-苯甲酰胺，其具有式(I)，

并且报道，该化合物作为激酶抑制剂、更具体地作为ALK抑制剂是有活性的，它因此适用于治疗多种癌症和细胞增殖疾病。

这种化合物的制备描述于上述提及的专利申请的实施例2(步骤i’)和实施例7中。

如描述于上述提及的专利申请的实施例2(步骤i’)的式(I)化合物的已知的制备基本上包括：将5-(3,5-二氟-苄基)-1H-吲唑-3-基胺的溶液加入至4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-[(四氢-吡喃-4-基)-(2,2,2-三氟-乙酰基)-氨基]-苯甲酰氯中，然后使用有机碱在高温下使得到的化合物脱保护，通过柱色谱法和结晶纯化之后，得到期望的式(I)的酰胺。