[发明专利]特定和定量兽毛种类的方法有效
申请号: | 201380019380.7 | 申请日: | 2013-04-10 |
公开(公告)号: | CN104395745B | 公开(公告)日: | 2017-09-29 |
发明(设计)人: | 西川一八;横川隆志;大野敏;林克优;松永展佳;本山绚 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人岐阜大学;一般财团法人毛检试验认证中心 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62;C07K5/00;C07K7/00;G01N33/483 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司72001 | 代理人: | 张桂霞,徐厚才 |
地址: | 日本岐阜*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 特定 定量 种类 方法 | ||
技术领域
本发明涉及特定兽毛种类的方法。详细而言,涉及从包含兽毛的试样中获得萃取物,对该萃取物使用质谱分析法特定和/或定量上述兽毛种类的方法。
背景技术
在兽毛产品中,山羊绒(cashmere)纤维由于采自在严酷自然环境下饲养的绒山羊(cashmere goat),因此持有特有的优异性质,以高价进行交易。但是,最近发生了在山羊绒纤维中混入其它动物纤维的质量伪装,已成为问题。
关于这些衣料品所涉及的标识,作为纤维鉴别或纤维混用率的试验方法,根据日本工业规格JIS L 1030(纤维产品的混用率试验方法),规定了使用显微镜法的试验方法。在显微镜法中,作为鉴别毛外观的手法,由于加工而使纤维表面的表面改变或山羊绒在外观上极为相似的情形,有可能影响鉴定结果。特别是,牦牛毛与棕色山羊绒在纤维的表面形状上酷似,被标识为100%山羊绒的产品中即使混入、混用牦牛毛,通过显微镜法也难以鉴定牦牛毛的混入,因此需要更确实且简便地鉴定在山羊绒中混入牦牛毛的方法。
除此之外,在显微镜法中,由于鉴别者的熟练度也可能发生鉴定的偏差。通常,通过多数人的鉴别者进行鉴定,来进行可信赖的鉴别,但显微镜法的辅助技术或与其相关的鉴定方法的开发是重要的课题。
作为利用显微镜法进行的鉴别技术的辅助技术,近年报道了利用DNA进行的鉴别法。特别是,关于包含山羊绒产品的纤维的鉴定,有来自财团法人日本纺织检查协会的申请号:特愿2003-297332(专利文献1:特开2004-121229号公报)、来自财团法人日本化学纤维检查协会的申请号:特愿平11-15616(专利文献2:特开2000-210084号公报)、申请号:特愿平11-135993(专利文献3:特开2000-325098号公报)等专利申请,其中,申请号:特愿平11-15616已经获得授权 (专利文献4:专利第3566570号公报)。这些方法是,基于每个细胞的存在数多的线粒体DNA、例如细胞色素b的序列来设计种特异性的DNA引物,通过以从兽毛产品中萃取的DNA为模板进行PCR来扩增DNA,通过分析该扩增DNA的分子量等来判定种。但是,尽管本发明人也开发了利用DNA进行的鉴定法,但在PCR中,在将是否扩增作为鉴定的判断标准时,即使由兽毛可以观察到扩增也存在着由于毛产品而无法扩增的情形。包含毛根的梳取下来的毛纤维比较容易进行DNA分析,而不含毛根的剪取下来毛纤维难以进行DNA分析,然而,在工业上,使用的几乎都是不含毛根的剪取下来毛纤维。另外,由于进行染料等的处理等,难以有效地萃取DNA。另外,由于对极少的DNA进行扩增,还存在假阳性的危险性,并且,实际上也存在着难以定量的问题。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:特开2004-121229号公报;
专利文献2:特开2000-210084号公报;
专利文献3:特开2000-325098号公报;
专利文献4:专利第3566570号公报。
发明内容
为了避免上述问题,本发明的课题在于,提供可以特定和定量兽毛种类的方法,该方法是:对于包含上述兽毛的试样,不是对存在量少的DNA进行分析,而是对作为兽毛的主要成分的蛋白质进行直接分析。
本发明的课题在于:提供通过日本工业规格JIS L 1030(纤维产品的混用率试验方法)规定的显微镜法进行的兽毛产品鉴别法的辅助或与其相关技术的开发。
本申请发明提供:对于作为兽毛的主要蛋白质成分的角蛋白等的蛋白质成分,通过对兽毛样本进行质谱分析,特定作为分析结果的质量、质荷比(m/z)、上述质荷比的LC洗脱时间、和作为标志物有用的部分序列,基于这些,进行兽毛种类的特定和定量、及混用率的算出的方法。
更具体而言,本申请发明人提供实现上述课题的下述发明。
A. 本申请发明
[1] 特定和/或定量兽毛种类的方法,其是对于包含兽毛的试样特定和/或定量上述兽毛种类的方法,其特征在于,该方法包含下述步骤:
(a) 通过前处理从上述试样中获得分析样本的步骤;
(b) 使用质谱分析法,分析上述步骤(a)中获得的分析样本,以获得结果的步骤;以及
(c) 根据上述步骤(b)中获得的结果,特定和/或定量上述兽毛种类的步骤。
[2] [1]中记载的方法,其中,除了上述质谱分析法之外,还可以将液相色谱法与质谱分析组合使用(也记作LC-MS或UPLC-MS)。
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