[发明专利]表达异源肿瘤相关抗原的腺病毒

说明书

本发明涉及用于癌症治疗的腺病毒，其包含一个或更多个编码肿瘤抗原的异源核酸序列，由此所述腺病毒在其表面上表达所述肿瘤抗原。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2012年2月2日提交的美国临时专利申请No.61/594,005的权益，其全部内容通过引用并入本文。

序列表、表格和计算机程序列表的说明

序列表以名为SEQ.tx(4KB，2013年2月1日)的文件附于本申请中，并且通过引用并入本文。

背景

1.技术领域

本发明一般性地涉及肿瘤学和癌症治疗的领域。更特别地，其涉及免疫原性腺病毒。

II.相关技术描述

癌症仍然是全世界人类发病率和死亡率的主要原因之一。虽然已经利用手术、化学疗法和放射来治愈(cure)癌症取得了一些成功，但是仍需要新的策略。在肿瘤细胞中比在正常细胞中复制得更好的病毒已显示出其作为溶瘤剂(oncolytic agent)的前景。已经很好地确立了使用腺病毒进行基因转移和肿瘤溶解的可行性(Kirn，1999；Bischoff等，1996；Wildner等，1999a；Wildner等，1999b；(Sterman等；Hum.Gene Ther.9：1083-1092(1998))。

仍然需要另外的抗癌疗法。

发明内容

有复制能力的腺病毒(replication competent adenovirus)可通过至少四种机制实现抗癌治疗。第一，腺病毒可启动并完成裂解性感染，从而使细胞裂解(溶瘤作用)。第二，腺病毒可表达自杀基因，例如胸苷激酶(HSVtk)基因或胞嘧啶脱氨酶-胸苷激酶融合蛋白(Rogulski等，Clin.Cancer Res.3：2081-2088(1997))，其将增加溶瘤活性。第三，可将施用腺病毒与化学疗法(包括任意药物治疗)或者放射组合以增强各药剂的溶瘤活性(Nielsen等，Cancer Gene Ther.4：835-846(1997))。最后，病毒可以起免疫刺激剂或者表达免疫刺激性分子之载体的作用，导致刺激针对肿瘤抗原的特定免疫效应细胞。使用溶瘤作用和免疫刺激的组合策略是特别吸引人的，因为其可通过“疫苗效应”提供长期的持久应答。因此，在本发明之前，本领域仍然需要具有对表达或展示肿瘤相关抗原之肿瘤细胞改善选择性的复制选择性腺病毒。

本发明涉及这样的腺病毒组合物，其具有整合到腺病毒外壳蛋白中的癌抗原、由腺病毒表达的癌抗原或者与腺病毒一起递送的癌抗原。在某些方面中，经修饰的外壳蛋白将包含经修饰的纤维蛋白(fiber protein)、六邻体蛋白或pIX蛋白。经抗原修饰的腺病毒将从第一复制周期起呈递癌抗原，从而使肿瘤环境中的癌抗原水平升高。肿瘤环境中抗原水平的升高将刺激针对癌抗原以及针对裂解的肿瘤细胞的免疫应答。在某些方面中，刺激免疫应答与肿瘤细胞的裂解组合，提供了增加肿瘤消退可能性之增强的抗肿瘤免疫。

嵌合腺病毒外壳蛋白可包含约3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29至约30个异源氨基酸，所述异源氨基酸插入或代替外壳蛋白氨基酸序列，或者替代地与腺病毒外壳蛋白的C-末端融合。所述腺病毒外壳蛋白可以是纤维蛋白、五邻体基底蛋白、六邻体或pIX蛋白。抗原可插入六邻体高变区1(人5型腺病毒氨基酸139-167)、纤维蛋白HI环(人5型腺病毒纤维蛋白(fiber)HI环氨基酸537-549)中，和/或与蛋白IX(人5型腺病毒蛋白IX氨基酸140)缀合或融合。在某些方面中，所述异源氨基酸通过约3个氨基酸至约30个氨基酸(包括其之间的所有值和范围)的间隔序列与嵌合腺病毒外壳蛋白连接。