[发明专利]间充质干细胞的培养

权利要求书

1.培养间充质干细胞(MSC)的方法，包括在包含烟酰胺和成纤维细胞生长因子4(FGF4)的培养基中培养MSC群，从而培养MSC。

2.权利要求1的方法，其中所述培养基包含DMEM。

3.权利要求1的方法，其中所述培养基包含血清或血小板裂解物。

4.权利要求1的方法，其中所述间充质干细胞由选自由骨髓、脂肪组织、胎盘和脐带血所组成的组中的组织衍生。

5.权利要求1的方法，其中所述烟酰胺选自由烟酰胺、烟酰胺类似物、烟酰胺代谢产物、烟酰胺类似物代谢产物及其衍生物所组成的组。

6.权利要求1的方法，其中所述培养在塑料表面上实施。

7.权利要求1的方法，其中所述MSC群包含在异质细胞群中。

8.权利要求7的方法，其中所述异质细胞群的至少70％为MSC。

9.权利要求1的方法，其中所述培养基的钙浓度大于1.8mM。

10.权利要求1的方法，其中实施所述培养至少一个星期。

11.权利要求1的方法，其中实施所述培养至少3次传代。

12.权利要求1的方法，其中所述烟酰胺的浓度为1-20mM。

13.权利要求1的方法，其中所述培养基没有血小板衍生生长因子(PDGF)。

14.扩增间充质干细胞群的方法，包括以对于细胞扩增为充足的时间段培养经播种的间充质干细胞群，其中在没有烟酰胺的培养基中在所述时间段的至少一部分实施所述培养；对于所述时间段的至少第二部分，在包含烟酰胺和FGF4的培养基中实施所述培养，从而产生扩增的间充质干细胞群。

15.权利要求14的方法，其中所述扩增在不诱导所述间充质干细胞的分化的条件下实施。

16.权利要求14的方法，其中所述经播种的间充质干细胞群是在不存在烟酰胺的情况下播种的。

17.权利要求14的方法，其中所述经播种的间充质干细胞群是在存在烟酰胺的情况下播种的。

18.权利要求14的方法，其中所述培养基没有血小板衍生的生长因子(PDGF)。

19.权利要求14的方法，其中所述没有烟酰胺的培养基没有FGF4。

20.权利要求14的方法，其中所述没有烟酰胺的培养基包含FGF4。

21.权利要求14的方法，其中在所述包含烟酰胺的培养基中的所述培养的实施先于在所述没有烟酰胺的培养基中的所述培养。

22.权利要求14的方法，其中在没有所述烟酰胺的所述培养基中的所述培养的实施先于在所述包含烟酰胺的培养基中的所述培养。

23.权利要求14的方法，其中实施在所述包含烟酰胺的培养基中的所述培养至少一天。

24.权利要求14的方法，其中实施在所述包含烟酰胺的培养基中的所述培养至少一个星期。

25.权利要求14的方法，其中实施在所述没有烟酰胺的培养基中的所述培养至少一天。

26.权利要求14的方法，其中实施在所述没有烟酰胺的培养基中的所述培养至少一个星期。

27.权利要求14的方法，其中在包含钙的培养基中实施在所述包含烟酰胺的培养基中的所述培养，其中所述钙的浓度大于1.8mM。

28.权利要求14的方法，其中在包含钙的培养基中实施在所述没有烟酰胺的培养基中的所述培养，其中所述钙的浓度大于1.8mM。

29.产生用于移植到受试者的细胞的方法，所述方法包括：

(a)根据权利要求1的方法培养间充质干细胞，以产生培养的间充质干细胞群；

(b)将所述培养的间充质干细胞群与分化剂接触，从而产生用于移植到受试者的细胞。