[发明专利]共使用簇集蛋白抑制剂和EGFR抑制剂以治疗癌症

说明书

技术领域

本发明涉及簇集蛋白抑制剂与表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂用于治疗癌症的组合。更具体地，本发明涵盖了簇集蛋白抑制剂如抗簇集蛋白抗体恢复癌细胞对EGFR抑制剂的敏感性或增强EGFR抑制剂作用的用途。

背景技术

化疗抗性的形成和侵袭至其他继发部位是实体瘤恶变的共同特征。众所周知化疗药耐药性的形成由参与药物和凋亡抗性的蛋白质过量表达引起。还相当充分地记录了侵袭过程。肿瘤侵袭由增加的癌细胞运动性和造成胞外基质中蛋白质降解的基因表达引起。存在以下日益增加的证据：化疗抗性和肿瘤侵袭可能通过称作上皮至间充质转变(EMT)的生物学过程共享共同的起点。最近研究已经展示，转化生长因子β(TGFβ)可能是EMT的关键介体。尽管这些进展，很少治疗途径可用于抑制化疗抗性形成和癌症向其他器官的扩散。最近文献中也已经出现，发生EMT的某些肿瘤细胞去分化并采取干细胞样特性(癌干细胞或CSC)。如同正常干细胞那样，CSC内在地抵抗化疗和放疗。因此，靶向EMT和CSC维持过程的特定调节物代表了一种增加针对化疗药的反应并防止癌症复发的非常有前景的治疗策略。

利用充分表征细胞系作为EMT的模型，鉴定了引起EMT后上调的蛋白质。发现这些蛋白质中的一种蛋白质(称作簇集蛋白的分泌型蛋白质(sCLU))在EMT期间受到刺激，并且本身可以促进EMT过程(Lenferink等人，2009)。产生了与sCLU相互作用的几种高亲和力抗体，其中，在基于细胞的测定法中对它们阻断EMT的能力测试时，中和EMT的这些抗体均与sCLU蛋白中的相同关键氨基酸序列结合。这个发现表明sCLU的特定区域负责介导其促进EMT的活性。通过阻断sCLU中的EMT-表位，抗体，尤其命名为16B5的抗体，可以阻断EMT，如通过与癌细胞孵育时维持上皮细胞标志物(E-钙黏着蛋白)的膜表达示例。另外，使用前列腺癌和胰腺癌肿瘤的人异体移植物动物研究显示，阻断肿瘤相关性sCLU的活性导致针对标准化疗药物如多西紫杉醇和吉西他滨的反应增加，如通过肿瘤生长显著减少所测量。总之，这些结果显示，用能够与sCLU中特定区域相互作用的抗体阻断EMT导致肿瘤生长抑制和针对细胞毒药物的反应增加(见以编号WO2007/030930公开的国际申请号PCT/CA 2006/001505和以编号WO2011/063523公开的国际申请号PCT/CA 2010/0001882，所述文献的完整内容通过引用的方式结合在此

肺癌是最常见癌症的之一和世界范围内死亡的主导原因，每年诊断超过1百万病例并且非小细胞肺癌(NSCLC)占多于80％的全部肺癌。尽管诊断方案和治疗方案的最新改善，大部分患者诊断患有其中中位数存活保持不良的晚期NSCLC(Adamo等人，2009)。

NSCLC中的最重要靶之一是表皮生长因子受体(EGFR)(受体酪氨酸激酶的ErbB家族的一个成员，其中所述受体酪氨酸激酶是在癌细胞的增殖和存活中发挥重要作用的细胞膜受体)。它是一种巨大的跨膜糖蛋白，充当EGF和几种另外内源性配体的受体。它具有三个结构域，由胞外区、跨膜结构域和胞内酪氨酸激酶(TK)结构域组成。在功能上，配体与EGFR结合诱导受体二聚化，导致促进自身磷酸化和胞内TK结构域激活的结构变化。因此，EGFR激活影响影响细胞增殖、侵袭性、运动性、存活和凋亡的多个下游信号传导途径，包括Ras/Raf/促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇-3'-激酶(PI3K)/Akt途径(Shigematsu等人，2005)。

虽然EGFR普遍表达，但是它经常在肿瘤细胞中被修饰。这些修饰包括基因扩增、配体和/或受体过量表达和激活性突变。EGFR或其原发性配体的过量表达或失调是许多种人实体肿瘤(包括肺癌)的特征。在NSCLC中，43％至83％的肿瘤过量表达EGFR(Adamo等人，2009)。针对EGFR如靶向胞外结构域的单克隆抗体的几种试剂或小分子能够抑制TK活性。