[发明专利]新颖的抗原的检测方法及利用该检测方法的装置

说明书

【技术领域】

本发明涉及新颖的抗原的检测方法及利用该检测方法的装置。

【背景技术】

开发不仅能够迅速简单测定复杂的试样中的分析对象(例如，抗原)，且测定值的可靠性高的抗原检测方法的重要性越来越大。例如，在医院的紧急情况下，临床诊断的要点为不熟练的技师实施复杂的化学或免疫化学分析方法，来迅速准确地测定患者的状态。这种化验通常由作为临床化学家未受过训练的医院的工作人员或护士实施。就向医院的化验室移送血液试样并实施分析的当前的临床诊断系统而言，在需要迅速的化验结果的情况下，不妥当。因此，需要能够在短时间内获得分析结果，且利用医院的诊断系统来实施化验的职员及装置符合上述要求的测定方法。

作为现有的抗原的测定方法，主要利用免疫检测(immunoassay)。尤其，当检查肿瘤标记物的项目时，大部分利用免疫检测(immunoassay)。免疫检测作为利用抗原抗体反应的检测，能够利用选择性地与要测定的物质相结合的抗体来测定所需的物质。代表性的免疫检测的种类和原理如下。虽然按不同器官使用的方法和具体的反应条件有所差异，但基本原理几乎相同。

凝集法(颗粒免疫检测，particle immunoassay)利用因抗原和抗体的结合而发生凝集反应(agglutination)的情况。大致测定如下情况，即，在红细胞或乳胶(latex)、明胶(gelatin)等附着抗原或抗体，当该粒子反应时，表示凝集。在凝集测定中，能够利用浊度测定法(turidimetry)来测定光的吸收程度，或者利用比浊法(nephelometry)来测定光的散射程度。

酶免疫测定法(EIA，enzyme immunoassay)利用酶反应(enzyme reaction)来测定抗原和抗体的结合。大部分预先在与要测定的物质相结合的抗体附着酶，并发生抗原抗体反应。之后，若放入与结合的酶反应的底物，则发生酶反应。通常利用的酶有碱性磷酸酶(alkaline phosphatase)、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase)、β半乳糖苷酶(β-galactosidase)等。酶反应的产物大部分为带色物质，利用分光光度计(spectrophotometer)来测定这些带色物质。

在放射免疫测定法中，利用放射性同位素(radioisotope)来测定抗原和抗体的结合。放射性同位素指在物理方面不稳定，且自然发生衰变(放射性衰变，radioactive decay)而转换为稳定的物质，在此过程中，放出放射线的物质。在要测定的物质之类的物质附着放射性同位素，或者在与要测定的物质反应的抗体附着放射性同位素，从而发生抗原抗体反应。在反应结束后，能够测定从反应物放出的放射线的量，并计算出所需的物质浓度。多利用的放射性同位素有¹²⁵I、¹³¹I、³H、¹⁴C、³²P等。过去多利用放射免疫测定法，但这有需要使用放射性物质的危险，且随着开发化学发光免疫测定法等方法，使用上述放射免疫测定法的情况越来越少。

在荧光免疫测定法中，利用荧光反应(fluorescence)来测定抗原和抗体的结合。荧光反应是指，荧光物质吸收特定波长的光，使得荧光物质的分子激励(excitation)，重新回到原来的状态，并放出与吸收的光不同的波长的光的反应。当利用于免疫测定时，在要测定的物质之类的物质附着荧光物质，或者在与要测定的物质反应的抗体附着荧光物质，从而发生抗原抗体反应。在反应结束后，若透射可进行荧光反应的波长的光，则与荧光物质的量成正比地呈现荧光，并根据上述荧光的量来计算测定物质的浓度。

在化学发光免疫测定法中，利用化学发光反应(chemiluminescence)来测定抗原和抗体的结合。化学发光反应是指，使化学发光物质激励(excitation)，并回到基态(ground state)而发光的现象，这在使分子激励的能量不是光而是化学反应的方面，与荧光不同。当利用于免疫测定时，与其他方法相同，在要测定的物质之类的物质附着化学发光物质，或者在与要测定的物质反应的抗体附着化学发光物质，从而发生抗原抗体反应。在反应结束后，并在进行所需的化学反应之后，测定所散发的发光程度，由此计算测定物质的浓度。代表性的发光物质有鲁米诺(luminol)、异鲁米诺(isoluminol)、吖啶酯(acridinium ester)等。