[发明专利]用于加强CD4+T细胞应答的经修饰表位

说明书

本发明涉及包含T细胞表位的免疫原性肽。所述的表位经修饰从而与用不含所述修饰的相同的肽得到的CD4+T细胞应答相比，可以得到强得多的CD4+T细胞应答。具体地，该修饰是添加半胱氨酸、插入半胱氨酸或使位于该肽的MHC‑结合位点的外侧相邻的位置上的残基突变成半胱氨酸。还公开了这类经修饰的肽在治疗、抑制或预防诸如感染性或过敏性疾病和自身免疫疾病的疾病、预防或抑制移植物排斥或肿瘤细胞的根除中的用途。

技术领域

本发明涉及包含T细胞表位的免疫原性肽。所述的表位经修饰，从而与用不含所述修饰的相同的肽得到的CD4+T细胞应答相比，可以得到强得多的CD4+T细胞应答。具体地，该修饰是在接近该肽的MHC-结合位点的但在该位点外侧的位置上添加半胱氨酸、插入半胱氨酸或使该位置的残基突变成半胱氨酸。还公开了这类修饰的肽在治疗、抑制或预防疾病(诸如感染性和过敏性疾病和自身免疫疾病)、预防或抑制移植物排斥，或肿瘤细胞的根除中的用途。

发明背景

针对病原体的疫苗接种的目标是引起尽可能强的特异性免疫应答。这样的疫苗接种使用固有免疫原性弱的抗原。这种弱免疫原性的原因与人群中组织相容性复合物的多样性较大有关。这类复合物(用于向CD8+T细胞呈递的I型或用于向CD4+T细胞呈递的II型)在称为抗原呈递细胞的特殊细胞的表面上向T细胞呈递抗原。T细胞被激活的强度取决于载有抗原加工后所得的肽的抗原呈递细胞和特异性T细胞之间形成突触的强度和持续时间。

克服弱免疫原性的常规方法是添加佐剂。已经描述了这些佐剂中的数种，从铝盐到油乳剂。佐剂增加免疫原性的机制是非特异性的，并且取决于使用的佐剂类型。然而，在许多情况中，佐剂的使用因炎性的不利影响而受到限制。

非常需要可特异性地增加疫苗抗原的免疫原性的通用方法。这涉及针对诸如细菌或寄生虫的胞外病原体的疫苗抗原，以及针对诸如病毒的胞内病原体的疫苗抗原。

可通过调节T细胞来抑制免疫应答。这类细胞属于在胸腺中集中选择的天然亚组或通过抗原接触在外周中得到的外周亚组，其使用多种机制来抑制免疫应答，包括产生诸如IL-10或TGF-β的抑制性细胞因子，使目标细胞缺少诸如精氨酸或色氨酸的必需营养素，或使细胞接触。天然调节T细胞库是自身反应性的，这归因于对胸腺中自体抗原呈递的选择。通过与自体抗原或同种异体抗原接触来形成和激活外周调节T细胞或诱导的调节T细胞。

抗原特异性的调节性T细胞的百分比很低，并且这些细胞难以在体外扩增。除此以外，在体内扩增这类细胞的方法也不太成功。例如，在没有佐剂的情况下给予包括MHC(主要组织相容性复合物)II型表位的合成肽引发IL-10生成型调节T细胞的扩增。然而，已知调节性T细胞的激活和扩增严格依赖于共刺激，即抗原呈递细胞的激活，导致共刺激分子的表面表达，所述分子包括与T细胞表面上的表面CD28相互作用的B7家族中的那些。CD28缺陷小鼠不产生调节性T细胞并且具有大幅增加的自身免疫疾病的发生率。

因此，非常需要使扩增调节T细胞所需的疫苗抗原的免疫原性提高的通用方法。在该设计中的疫苗抗原包括自体抗原和同种异体抗原。

许多肿瘤表达可用为治疗靶标的抗原。这类抗原从肿瘤上脱落并且由宿主抗原呈递细胞向宿主免疫系统呈递。这种称为间接抗原呈递途径的过程引发肿瘤特异性CD4+和CD8+T细胞。然而，在大多数情况下，肿瘤细胞并不表达MHC II型决定簇，并且有效免疫应答仅仅依赖于识别由MHC I型决定簇呈递的肿瘤源性肽的CD8+T细胞。如使用I型限制的肽增强肿瘤特异性CD8+T细胞的各种尝试所示，这是低效的(Boon等，2006，Ann Rev Immunol24，175-208)。因此需要新的策略。

已有一些提议称肿瘤特异性CD4+T细胞甚至可以在肿瘤不表达MHC II型决定簇时在肿瘤排斥中起作用(Perez-Diez等，2007，Blood 15，5346-5354)，这表明对NK细胞或间质细胞有间接影响。然而，还没有提出增强CD4+T细胞应答的尝试。