[发明专利]血细胞检测试剂及血细胞处理方法和识别方法

说明书

技术领域

本申请涉及血细胞检测领域，特别是涉及一种血细胞检测试剂，以及利用该试剂对血细胞进行处理、识别的方法。

背景技术

外周血中的血细胞由造血干细胞增殖、分化、发育而成。血细胞逐渐成熟并进入外周血行使特定的功能：其中网织红细胞（Reticulocytes，RET）是尚未完全成熟的红细胞。未成熟白细胞是指未完成分化、发育的白细胞(未成熟白细胞也称为幼稚白细胞，主要包括原始细胞（Blast）、幼稚粒细胞（IG）、幼稚淋巴细胞等)。临床上，需要检验血液样本中的网织红细胞和未成熟白细胞。

美国专利5492833公开了一种利用红细胞影化试剂去除红细胞内血红蛋白，并通过光散射的检测方法实现网织红细胞分类的方法。美国专利5891731、5812127公开了可以染色网织红细胞和白细胞试剂荧光染料，可以实现网织红细胞与红细胞的区分，并能够差异染色白细胞和网织红细胞，去除白细胞的干扰。但这些网织红细胞检测的试剂并不能就未成熟白细胞进行检测。

中国专利CN94102901.8公开了使幼稚白细胞与其它细胞类群在体积和内部结构产生差别的试剂，用该试剂处理血液等液体样本，检测电导信号（DC）和高频电流信号（RF）实现幼稚白细胞的区分。美国专利5958776公开了一种溶解红细胞，损伤成熟白细胞，保护并维持未成熟细胞形态结构，同时对受损伤的白细胞进行特异性荧光染色，实现未成熟细胞区分。这几种方法均需要溶解红细胞、容易受到红细胞碎片的干扰，同时对白细胞的损伤破坏了白细胞的内部形态结构信息。

综上所述，目前的检测方法中无同时检测未成熟白细胞、白细胞及网织红细胞的方法的报道。如可通过一种试剂，实现在一次检测中对多种细胞进行检测，将会在很大程度上降低检测成本，并减少仪器的复杂性，对医疗设备的普及和推广具有较大的意义。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本申请的目的在于提供一种可实现同时对多种血细胞进行检测的试剂，尤其是提供一种可现实同时对未成熟白细胞和网织红细胞进行检测的试剂。

同时，本申请还提供了一种血细胞处理方法和一种血细胞识别方法。

为实现上述目的，本申请采用了以下技术方案。

本申请提供了一种血细胞检测试剂，该试剂包括：荧光染料、球形化组分和有机醇。其采用的荧光染料具有细胞通透性，且可以对细胞内核酸物质特异性染色。其采用的球形化组分能够球形化红细胞，保持红细胞膜完整且不对白细胞的内部结构产生破坏作用。其采用的有机醇能够增加细胞通透性，协助荧光染料进入细胞。

本申请还公开了一种血细胞处理方法，该方法包括：将待测样品与荧光染料、球形化组分和有机醇混合，得到处理后的样品。该荧光染料具有细胞通透性，且可以对细胞内核酸物质特异性染色。该球形化组分能够球形化红细胞，保持红细胞膜完整且不对白细胞的内部结构产生破坏作用。该有机醇能够增加细胞通透性，协助荧光染料进入细胞。

在本申请的具体实施方式中，上述处理方法中的混合时间优选为5到60秒，更优选20-50秒。

此外，本申请还公开了一种血细胞识别方法，该识别方法包括（1）将含有血细胞的待测样品与上述包括荧光染料、球形化组分和有机醇的试剂混合反应，使待测样品中的红细胞球形化，保持红细胞膜完整且不破坏白细胞的内部结构，对细胞内部核酸物质进行荧光染色，该血细胞中含有网织红细胞和未成熟白细胞。（2）检测处理后的血细胞的荧光信号和至少一种散射光信号，根据检测结果同时识别出网织红细胞和未成熟白细胞。

在本申请的具体实施方式中，上述识别方法中的混合时间优选为5到60秒，更优选20-50秒。

同时，本申请也提供了上述试剂和试剂盒在血细胞检测领域的应用。

本申请的有益效果是：本申请提供的试剂中包括荧光染料、球形化组分与有机醇，与血细胞反应时三者配合使用产生协同作用，使得细胞的膜通透性增加，可实现在不破坏血细胞细胞膜的情况下染色网织红细胞、成熟白细胞和未成熟白细胞等细胞。将待测样品与本申请提供的试剂混合一定时间再通过光学检测，即可实现通过一种试剂在一次检测中对不同血细胞，尤其是对未成熟白细胞和网织红细胞的同时检测。

附图说明

图1是本申请的一种血细胞检测装置的光学检测系统模式图；