[发明专利]血细胞检测试剂及血细胞处理方法和识别方法

权利要求书

1.一种血细胞检测试剂，其特征在于，所述试剂包括：

荧光染料，所述荧光染料具有细胞通透性，且可以对细胞内核酸物质特异性染色；

球形化组分，所述球形化组分能够球形化红细胞，保持红细胞膜完整且不对白细胞的内部结构产生破坏作用；

有机醇，所述有机醇能够增加细胞通透性，协助所述荧光染料进入细胞。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述荧光染料具有如下结构通式I：

其中

R₁和R₂各自独立选自H、OH、C_1-18烷基、C_1-6烷基OR₅、C_1-18烷基磺酸基、苯基或卤素；

R₃和R₄各自独立选自C_1-6烷基COOR₆、C_1-6烷基OR₆、苄基，所述苄基由卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、芳基、烷氧基、杂环基、卤代烷基、氨基、烷基氨基、酰氨基、羧基任选取代；

R₅为H或C_1-6烷基；

R₆为C_1-6烷基或者苯基，所述苯基由卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、芳基、烷氧基、杂环基、卤代烷基、氨基、烷基氨基、酰氨基、羧基任选取代；

X为C(CH₃)₂、O、S或Se；

Y^-为负离子，优选卤素离子、ClO₄^-、PF₆^-、CF₃SO₃^-、BF₄^-、乙酸根或对甲苯磺酸负离子；

n为1、2或3。

3.如权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述的荧光染料选自以下荧光染料A、荧光染料B或荧光染料C：

4.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述球形化组分为表面活性剂，所述表面活性剂选自阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂和两性表面活性剂中的至少一种。

5.如权利要求4所述的试剂，其特征在于，所述表面活性剂的浓度为1mg/L-4g/L，优选1mg/L-100mg/L。

6.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述有机醇为具有如下结构通式Ⅱ的醇类或C_1-6烷基醇中的至少一种；

其中

n为2到8的正整数；

R₁为C_1-6烷基、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、烷氧基、杂环基、卤代烷基、氨基、烷基氨基、酰氨基或羧基。

7.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂的pH值范围选自5.0-11.0。

8.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂的渗透压范围选自150-700mOsm/kg。

9.一种血细胞处理方法，其特征在于，所述方法包括：

将待测样品与荧光染料、球形化组分和有机醇混合，得到处理后的样品；

所述荧光染料具有细胞通透性，且可以对核酸物质特异性染色；所述球形化组分能够球形化红细胞，保持红细胞膜完整且不对白细胞的内部结构产生破坏作用；所述有机醇能够增加细胞通透性，协助所述荧光染料进入细胞。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述混合的时间为5到60秒，优选20-50秒。

11.一种血细胞识别方法，所述方法包括：

（1）将含有血细胞的待测样品与权利要求1-8中任一项的试剂混合反应，使待测样品中的红细胞球形化，保持红细胞膜完整且不破坏白细胞的内部结构，对细胞内部核酸物质进行荧光染色，所述血细胞中含有网织红细胞和未成熟白细胞；

（2）检测所述血细胞荧光信号和至少一种散射光信号，根据检测结果同时识别出网织红细胞和未成熟白细胞。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于：所述混合反应的时间为5到60秒，优选20-50秒。