[发明专利]与艰难梭菌细胞毒素B相互作用的蛋白

权利要求书

1.与艰难梭菌细胞毒素B相互作用的蛋白，其特征在于，其为硫酸软骨素蛋白多糖CSPG4，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

2.与艰难梭菌细胞毒素B相互作用的多肽，其特征在于，其由CSPG4蛋白N端640个氨基酸组成，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

3.一种抗艰难梭菌感染的药物，其特征在于，其有效成分为权利要求1所述蛋白或权利要求2所述多肽。

4.一种用于诊断艰难梭菌感染的试剂，其特征在于，所述试剂中含有权利要求1所述蛋白或权利要求2所述多肽。

5.一种用于诊断艰难梭菌感染的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括权利要求4所述试剂。

6.CSPG4蛋白在制备抗艰难梭菌感染药物及诊断试剂中的应用。

7.权利要求2所述多肽在制备抗艰难梭菌感染药物及诊断试剂中的应用。

8.CSPG4基因打靶载体，其构建方法包括以下步骤：

1）基于TALEN基因敲除技术，采用ULtiMATE方法组装针对CSPG4编码序列5'-TCCAGCCCCCGGCCT-3'以及5'-CTGGCCAACATAGTC-3'的DNA识别区段，并最终克隆至pGL3-TALEN载体中；

2）基于CRISPR系统的基因敲除载体，以CSPG4编码序列5'-TTGGCCAGACTTGCATCCG-3'为靶序列，通过酶切，将U6启动子、靶序列和gRNA5'-GTTTTAGAGCTAGAAATAGCAAGTTAAAATAAGGCTAGTCCGTTATCAACTTGAAAAAGTGGCACCGAGTCGGTGCTTTTTTT-3'依次连接，并克隆至pGL3-basic载体中，即得CSPG4基因打靶载体。

9.含有权利要求8所述打靶载体的宿主细胞。

10.根据权利要求9所述的宿主细胞，其特征在于，其为人或哺乳动物细胞。