[发明专利]一种抗耐药肿瘤的靶向制剂、制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物制剂，尤其是一种抗耐药肿瘤的靶向制剂、制备方法及应用，属于制药技术领域。

背景技术

目前，化学治疗已和手术治疗、放射治疗成为恶性肿瘤不可或缺的重要治疗手段。临床化疗过程中，近年来新的化疗药物不断出现,恶性肿瘤化疗失败的现象却屡见不鲜,其主要原因就是长期应用抗肿瘤药物后所形成的肿瘤多药耐药（multidrug resistance,MDR）现象。MDR是指在化疗过程中，当肿瘤细胞对某种治疗药物产生耐药性后,对未接触过的、结构不同、作用机制各异的其他抗肿瘤药物具有交叉耐药性。MDR是当今肿瘤治疗的一大难题,据美国癌症协会估计，90%以上的肿瘤患者死于不同程度的耐药。1970年，Biedler等首次观察到了MDR现象，从此之后,人们对产生MDR的诸多机制进行了深入的研究，主要包括膜蛋白介导的MDR，酶类介导的MDR和细胞凋亡基因介导的MDR。其中，由膜蛋白介导的药物外排是产生MDR最为重要的机制。目前所知的与MDR相关的膜转运蛋白主要包括P-糖蛋白（P-gp），多药耐药相关蛋白（MRP1-9），肺耐药相关蛋白（LRP）和乳腺癌耐药蛋白（BRCP）。

目前，肿瘤MDR的逆转策略主要体现在4个方面，一是对原有的抗肿瘤药物进行结构改造，开发新的不易产生耐药性的抗肿瘤药物；二是开发针对P-gp等耐药机制的化疗增敏剂，但这些化疗增敏剂普遍存在中毒剂量与有效剂量相近，难以达到逆转有效浓度，以及作用靶点单一，选择性低等问题，而且逆转剂与化疗剂合并使用，可能导致抗肿瘤药的毒副作用加剧；三是使用表面活性剂类抑制剂，文献报道一些具有两亲性结构的表面活性剂也具有抑制P-gp的作用；四是纳米技术的应用，大量研究表明，药物载体可以增加药物在耐药组织中的药物浓度以克服MDR。

金纳米粒(gold nanoparticles,GNP)是近来出现的一种新型优良载体,它能将所负载的物质有效传递到靶部位,这些物质包括小分子药物或生物大分子,如蛋白质、DNA和RNA。由于GNP特殊的物理及化学特性,因此在传递及负载药物方面具有优势。

阿霉素(doxorubicin，DOX)是一种蒽环类广谱抗肿瘤药,具有强烈的细胞毒性，可广泛应用于治疗肝癌、白血病、淋巴瘤、卵巢癌及晚期乳腺癌。但其心脏毒性和骨髓抑制较明显，直接应用对患者正常细胞损伤比较大。化疗过程中，阿霉素对肿瘤组织特异性较差,可引起剂量限制性毒性。而且肿瘤细胞也可对多种化疗药物产生抗药性。阿霉素分子结构式：

以上问题一直限制着其在肿瘤治疗中的应用，当前迫切需要解决的技术问题是为阿霉素提供一种递药系统，以克服单纯药物在对抗耐药肿瘤时不能发挥良好药效的难题。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的缺陷，提出一种抗耐药肿瘤的靶向制剂、制备方法及应用，使单纯药物在对抗耐药肿瘤时能够发挥良好药效。

本发明通过以下技术方案解决技术问题：一种抗耐药肿瘤的靶向制剂，由A、B、C、D四部分组成，所述A部分为金纳米粒，B部分为聚乙二醇，C部分为腙键，D部分为化疗药物。

其中，所述化疗药物为阿霉素。

本发明进一步提供抗耐药肿瘤的靶向制剂的制备方法，采用柠檬酸钠还原法制备柠檬酸盐保护的金纳米粒子，再使用聚乙二醇替换金纳米表面的柠檬酸制得聚乙二醇保护的金纳米粒。最后将阿霉素和金纳米粒通过腙键相连接制备得到具有抗耐药肿瘤作用的靶向制剂，具体方法包括以下步骤：

步骤一、取50mg柠檬酸钠溶于50mL去离子水中，加入0.615mL浓度为0.02g/mL的氯金酸，再加入1.2mL浓度为0.1M的还原剂，搅拌30min得到酒红色的柠檬酸盐保护的金纳米粒；

步骤二、取4mL浓度为0.28mM的聚乙二醇水溶液与柠檬酸盐保护的金纳米粒3mL混合，搅拌1h，再用去离子水透析72h，得到聚乙二醇保护的金纳米粒；

步骤三、取45mg阿霉素、100mg肼基甲酸叔丁酯溶于10mL乙醇中，加入100μL三乙胺，室温避光氮气保护反应12h，60℃减压蒸发去除有机溶剂，将暗红色产物溶于10mL二氯甲烷中，向溶液中滴加2mL三氟乙酸，室温下避光搅拌30min，40℃减压蒸发去除有机溶剂，溶于3mL去离子水中，在pH7.2水溶液中透析2d，冷冻干燥得到阿霉素腙键；