[发明专利]表达人源化免疫球蛋白的转基因动物中B细胞凋亡的抑制

说明书

本申请是申请日为2006年8月2日、中国申请号为201110333692.8、发明名称为“表达人源化免疫球蛋白的转基因动物中B细胞凋亡的抑制”的发明申请的分案申请。

发明领域

本发明涉及用于增强经历短期淋巴细胞生成(lymphopoiesis)的动物中的B细胞存活的方法。本发明进一步涉及用于增强表达外源免疫球蛋白或免疫球蛋白链转基因基因座的转基因动物的B细胞存活以提高免疫球蛋白生成的方法。本发明进一步涉及用于选择性增强表达任何免疫球蛋白转基因基因座的外源B细胞的存活胜过不表达转基因基因座的内源B细胞的方法，其通过只在表达转基因所编码的免疫球蛋白的外源B细胞中但不在表达内源免疫球蛋白的B细胞中选择性表达任何凋亡抑制剂来实现。此方法容许提高转基因所编码的（一种或多种）产物的表达和生成胜过转基因动物内源生成的免疫球蛋白。本发明还提供了新的凋亡抑制剂，兔bcl-2。

发明背景

表达人-小鼠嵌合抗体的小鼠的产生记载于Pluschke et al.,Journal of Immunological Methods215:27-37(1998)。表达人免疫球蛋白多肽的小鼠的产生记载于Neuberger et al.,Nature338:350-2(1989);Lonberg et al.,Int.Rev.Immunol.13(1):65-93(1995);Bruggemann et al.,Curr.Opin.Biotechnol.8(4):455-8(1997)。使用BAC克隆产生转基因小鼠记载于Yang et al.,Nat.Biotechnol.15:859-65(1997)。表达人抗体的牛的产生记载于Kuroiwa et al.,Nature Biotech.20(9):889-894(2002)。

动物中的基因转移(transgenesis)记载于Wall RJ,Theriogenology57(1):189-201(2002)。转基因兔的产生记载于Fan J et al.,Pathol.Int.49:583-94(1999);Brem et al.,Mol.Reprod.Dev.44:56-62(1996)。转基因鸡的产生记载于Etches et al.,Methods in Molecular Biology62:433-450(1997);Pain et al.,Cells Tissues Organs165(3-4):212-9(1999);Sherman et al.,Nature Biotech.16:1050-1053(1998)。

免疫球蛋白表达受损的兔记载于Chen et al.,J.Immunol.150:2783-2793(1993);Lamoyi E and Mage RG,J.Exp.Med.162:1149-1160(1985)。无γ球蛋白血症鸡记载于Frommel et al.,J.Immunol.105(1):1-6(1970);Benedict et al.,Adv.Exp.Med.Biol.88(2):197-205(1977)。

自细胞克隆动物记载于T.Wakayama et al.,Nature394:369-374(1998);J.B.Cibelli et al.,Science280:1256-1258(1998);J.B.Cibelli et al.,Nature Biotechnology16:642-646(1998);A.E.Schnieke et al.,Science278:2130-2133(1997);K.H.Campbell et al.,Nature380:64-66(1996)。兔的核转移克隆记载于Stice et al.,Biology of Reproduction39:657-664(1988);Challah-Jacques et al.,Cloning and Stem Cells8(4):295-299(2003)。

表达人/人源化免疫球蛋白转基因座的非人转基因动物的产生和抗体自此类转基因动物的产生详细记载于PCT出版物WO 92/03918、WO 02/12437、及美国专利5,545,807、5,814,318和5,570,429。嵌合哺乳动物宿主的同源重组例示于美国专利5,416,260。用于将DNA引入胚胎的方法记载于美国专利5,567,607。胚胎干细胞的维持和扩增记载于美国专利5,453,357。