[发明专利]表达人源化免疫球蛋白的转基因动物中B细胞凋亡的抑制

权利要求书

1.一种转基因表达构建物，其包含编码融合蛋白的转基因，其中所述融合蛋白包含如下次序的多肽序列：a)免疫球蛋白或免疫球蛋白链；b)自身切割肽；c)凋亡抑制剂；和任选的d)a)与b)之间的蛋白酶切割位点。

2.权利要求1的转基因表达构建物，其中所述蛋白酶切割位点选自天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶和苏氨酸蛋白酶的位点。

3.权利要求1的转基因表达构建物，其中所述蛋白酶切割位点是弗林蛋白酶切割位点。

4.权利要求1的转基因表达构建物，其中所述免疫球蛋白或免疫球蛋白链是人的/人源化的免疫球蛋白重链和/或轻链。

5.权利要求1的转基因表达构建物，其中所述自身切割肽衍生自病毒的2A/2B或2A样/2B肽。

6.权利要求5的转基因表达构建物，其中所述病毒选自小RNA病毒科、马A型鼻炎病毒(ERAV)科、小RNA病毒样昆虫病毒科和C型轮状病毒科。

7.权利要求6的转基因表达构建物，其中所述病毒选自口蹄病病毒(FMDV)、马A型鼻炎病毒(ERAV)和Thosea asigna病毒(TaV)。

8.权利要求1的转基因表达构建物，其中所述凋亡抑制剂选自bcl-2、胱天蛋白酶-9-DN突变体、杆状病毒p35、胱天蛋白酶-9S、crmA、z-VAD-fmk、z-DEVD-fmk、B-D-fmk、z-YVAD-fmk、Bcl-x_L、Mcl-1、XIAP、TIAP、KIAP、NAIP、cIAP1、cIAP2、API1、API2、API3、API4、HIAP1、HIAP2、MIHA、MIHB、MIHC、ILP、ILP-2、TLAP、存活蛋白、livin、apollon、BRUCE、MLIAP、SODD和FLIP及其变体。

9.权利要求1的转基因表达构建物，其中所述凋亡抑制剂是哺乳动物的bcl-2。

10.权利要求9的转基因表达构建物，其中所述哺乳动物bcl-2选自人的bcl-2、小鼠的bcl-2和兔的bcl-2。

11.一种分离的宿主细胞，其是经过权利要求1的转基因表达构建物的转化的宿主细胞。

12.一种多肽，其包含SEQ ID NO:5的兔bcl-2多肽。

13.DNA片段，自5'至3'包含KpnI位点、与CγM2的50个核苷酸相同的序列、编码F2A的序列、编码人bcl-2的序列、FRT5位点和EcoRI位点，或者自5'至3'包含EcoRI位点、FRT位点、编码IgM-M2的序列、编码F2A和bcl-2的序列、FRT2位点和EcoRI位点。