[发明专利]一种丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR检测试剂盒在审
| 申请号: | 201310737128.1 | 申请日: | 2013-12-27 |
| 公开(公告)号: | CN104745721A | 公开(公告)日: | 2015-07-01 |
| 发明(设计)人: | 迟大利;吴大治;夏懿 | 申请(专利权)人: | 上海星耀医学科技发展有限公司;上海复星医药(集团)股份有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 无 | 代理人: | 无 |
| 地址: | 201315 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 肝炎 病毒 一步法 核酸 定量 基因 rt pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:本发明通过考察丙型肝炎病毒基因组全序列,并对检索所得HCV各个基因型一致性保守序列及不同基因型间差异性保守序列,根据该保守序列设计出一对HCV特异性定量引物、一条HCV特异性荧光探针、一对HCV特异性分型引物、一条HCV1型特异性荧光探针、一条HCV2型特异性荧光探针和一条内参探针,采用实时荧光定量PCR方法扩增目的基因。
2.权利要求1所述的丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:丙型肝炎病毒HCV RNA特异性定量序列及1型、2型HCV RNA特异性PCR扩增的基因序列和内参基因序列分别为:
〈SEO ID No.1〉
5’-GACGTCTACATTGGCCATGGCGTTCAGTATGAGTGTCTCCAGGGACGGGAGAGTCCTTCCATTGATGTGCAAGCCGGCTTAAAGGCCCTCACCACAATAATATCCTCAGTACACAGTGGTCTGTCGGAGCAACACCG-3’,
〈SEQ ID No.2〉
5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACAATAATATCAGTAGCAACCCTCTATTGAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’,
〈SEQ ID No.3〉
5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACATTAATATCARTAGCAACCCTCTGGTGAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’,
〈SEQ ID No.4〉
5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACACCACCAATTGGTTCCTCTCTGTGCACAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’,
丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR检测试剂盒中核酸定量扩增基因序列全长137bp,属HCV5’-UTR非转录区;基因分型扩增基因序列全长137bp,属HCVNS5A结构基因区,均为单拷贝序列。内参基因序列全长137bp,仅与基因分型扩增基因中的探针序列有所不同。
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