[发明专利]一种丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR检测试剂盒在审

专利信息
申请号: 201310737128.1 申请日: 2013-12-27
公开(公告)号: CN104745721A 公开(公告)日: 2015-07-01
发明(设计)人: 迟大利;吴大治;夏懿 申请(专利权)人: 上海星耀医学科技发展有限公司;上海复星医药(集团)股份有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68
代理公司: 代理人:
地址: 201315 上海*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 肝炎 病毒 一步法 核酸 定量 基因 rt pcr 检测 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:本发明通过考察丙型肝炎病毒基因组全序列,并对检索所得HCV各个基因型一致性保守序列及不同基因型间差异性保守序列,根据该保守序列设计出一对HCV特异性定量引物、一条HCV特异性荧光探针、一对HCV特异性分型引物、一条HCV1型特异性荧光探针、一条HCV2型特异性荧光探针和一条内参探针,采用实时荧光定量PCR方法扩增目的基因。 

2.权利要求1所述的丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR检测试剂盒,其特征在于:丙型肝炎病毒HCV RNA特异性定量序列及1型、2型HCV RNA特异性PCR扩增的基因序列和内参基因序列分别为: 

〈SEO ID No.1〉 

5’-GACGTCTACATTGGCCATGGCGTTCAGTATGAGTGTCTCCAGGGACGGGAGAGTCCTTCCATTGATGTGCAAGCCGGCTTAAAGGCCCTCACCACAATAATATCCTCAGTACACAGTGGTCTGTCGGAGCAACACCG-3’, 

〈SEQ ID No.2〉 

5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACAATAATATCAGTAGCAACCCTCTATTGAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’, 

〈SEQ ID No.3〉 

5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACATTAATATCARTAGCAACCCTCTGGTGAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’, 

〈SEQ ID No.4〉 

5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACACCACCAATTGGTTCCTCTCTGTGCACAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’, 

丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR检测试剂盒中核酸定量扩增基因序列全长137bp,属HCV5’-UTR非转录区;基因分型扩增基因序列全长137bp,属HCVNS5A结构基因区,均为单拷贝序列。内参基因序列全长137bp,仅与基因分型扩增基因中的探针序列有所不同。 

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