[发明专利]一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法

权利要求书

1.一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法，其特征在于该方法依次包括以下步骤：

步骤一：一号培养基、二号培养基的配置：

所述一号培养基的配置方法为：先称取NaCl250g、MgCl₂·6H₂O30g、酵母粉2g、乳清蛋白水解物2.5g、琼脂10～15g并加水混合定容至1000mL以形成固液混合物，再将该固液混合物于0.69×10⁵Pa、100～125℃下灭菌10～60min以得到一号培养基；

所述二号培养基的配置方法为：先称取NaCl250g、MgCl₂·6H₂O30g、酵母粉2g、乳清蛋白水解物2.5g、琼脂4～15g并加水混合定容至1000mL以形成固液混合物，再将该固液混合物于0.69×10⁵Pa、100～125℃下灭菌10～60min以得到二号培养基；

步骤二：待测嗜盐古生菌的培养：先向平皿中倒入一号培养基，待一号培养基凝固后在其上均匀涂布待测嗜盐古生菌，再将涂布有待测嗜盐古生菌的一号培养基于42～45℃培养至形成单菌落；

步骤三：双层平板的制备：先向平皿中倒入一号培养基，待一号培养基凝固干燥后，将培养到对数期的指示菌液与42～45℃下的二号培养基混合均匀以形成混合培养液，然后将该混合培养液倒入一号培养基上，并使混合培养液凝固以形成双层平板，其中，所述指示菌为Natrinema sp.J7-2嗜盐古生菌，所述指示菌液的体积为300μL，二号培养基的体积为4.7～5mL；

步骤四：噬菌体的鉴定：将步骤二中形成的单菌落接种到双层平板上，并于42～45℃下恒温培养2d后观察双层平板上是否形成噬菌斑，若形成噬菌斑则表明待测嗜盐古生菌内寄宿有假溶源性噬菌体SNJ1，若未形成噬菌斑则表明待测嗜盐古生菌内未寄宿假溶源性噬菌体SNJ1，此时，嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定完成。

2.根据权利要求1所述的一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法，其特征在于：步骤四中，所述接种是指先在平皿的背面划分多个等分区块，然后挑取单菌落直接移殖到双层平板上的等分区块内。

3.根据权利要求1所述的一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法，其特征在于：步骤四中，所述接种是指先在平皿的背面划分多个等分区块，再挑取单菌落并将其加入到20μL液体培养基中混合均匀，然后取6μL混有单菌落的液体培养基滴加到双层平板上的等分区块内，其中，所述液体培养基的配置方法为：先称取NaCl250g、MgCl₂·6H₂O30g、酵母粉2g、乳清蛋白水解物2.5g并加水混合定容至1000mL以形成混合溶液，然后将该混合溶液于0.69×10⁵Pa、100～125℃下灭菌10～60min以得到液体培养基。

4.根据权利要求1所述的一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法，其特征在于：步骤四中，所述接种是指采用影印法将单菌落影印到双层平板上。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法，其特征在于：步骤二中，所述待测嗜盐古生菌的培养时间为5～7d。