[发明专利]一株屎肠球菌的培养方法及应用有效
| 申请号： | 201310719855.5 | 申请日： | 2013-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN103981116A | 公开（公告）日： | 2014-08-13 |
| 发明（设计）人： | 乔琳;姚宏明;高长斌;刘蕊;金忠辉 | 申请（专利权）人： | 北京伟嘉人生物技术有限公司;沈阳伟嘉牧业技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;A23K1/16;C12R1/46 |
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| 地址： | 100085 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一株屎肠 球菌 培养 方法 应用 | ||
1.一株屎肠球菌的培养方法及应用，其特征在于，所述的屎肠球菌(Enterococcus faecium)为WEI-9，保藏编号为CGMCC No.7745。
2.权利要求1所述的培养方法，其特征在于：将屎肠球菌(Enterococcus faecium)WEI-9CGMCC No.7745接种到该菌的专用液体培养基中，30-40℃下静置或不通气培养。所述专用液体培养基的配方为：每1000mL水中含有：乳清粉10-30g，蛋白胨10-30g，柠檬酸铵1-3g，三水合乙酸钠2-8g，七水合硫酸镁0.1-0.5g，一水合硫酸锰0.02-0.08g，三水合磷酸氢二钾1-3g，吐温800.5-1.5g，pH值为6.5-7.5。
3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：所述专用液体培养基的优选配方为：每1000mL水中含有：乳清粉21.34g，蛋白胨21.94g，柠檬酸铵2g，三水合乙酸钠5g，七水合硫酸镁0.2g，一水合硫酸锰0.05g，三水合磷酸氢二钾2g，吐温801g，pH值为7。
4.根据权利要求2-3所述培养方法，其特征在于：接种比例为1％；培养温度为37-40℃；静置或不通气培养，培养时间为10-12h。
5.权利要求1所述的屎肠球菌的培养方法及应用，其特征在于：应用是以以屎肠球菌(Enterococcus faecium)WEI-9CGMCC No.7745为主要原料制备微生态制剂。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述微生态制剂的制备方法为：屎肠球菌(Enterococcus faecium)WEI-9CGMCC No.7745经一级种子摇瓶和50L发酵罐富集后的发酵液通过高速管式离心机收集，与保护剂混合均匀，先于-70℃预冻，然后置于真空冷冻干燥机中干燥后获得活性菌粉，将菌粉用粉碎机破碎后与同样粒度的麸皮混合，获得微生态制剂产品。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述高速管式离心机收集菌体的转速为15000-20000rpm；保护剂配方为：每1000mL水中含有：脱脂奶粉100g，麦芽糊精10g，海藻糖15g，甘油5g，山梨醇20g。
8.根据权利要求6-8所述的应用，其特征在于：将保护剂与离心后的菌泥按照体积质量比5∶1混合均匀，于-70℃预冻2-3h，然后置于真空冷冻干燥机中真空冻干44h后结束，冻干参数如下：真空度小于30Pa，冷阱温度为-40℃至-50℃。
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