[发明专利]鸡新城疫病毒抗体水平相关的分子标记及其鉴别方法和应用

权利要求书

1.鸡新城疫病毒抗体水平相关的分子标记，其特征在于，所述分子标记包括分子标记一和分子标记二：

所述分子标记一为如SEQ ID NO：2所示序列中的第50位碱基处G/A碱基突变，

所述分子标记二为如SEQ ID NO：3所示序列中的第167位碱基处T/C碱基突变。

2.一种鉴别权利要求1所述的分子标记一的方法，其特征在于，包括以下步骤：以鸡ROBO2基因的DNA序列为模板，选择如下引物进行扩增及焦磷酸测序检测：

RS-exon5-F：5'-AGGAGGAGGCCGTGGATTT-3'，其中该引物序列的5’末端标记有生物素，

RS-exon5-R：5'-TTGGCAGGTCTGCGTCAT-3'，

PS-exon5-SR：5'-CTTCTTCCAGCGGAC-3'；

若测序结果为TT基因型，则是发生突变的AA基因型；

若测序结果为CC基因型，则是没有发生突变的GG野生型；

若测序结果为TC基因型，则是AG杂合型。

3.一种鉴别权利要求1所述的分子标记二的方法，其特征在于，包括以下步骤：以鸡ROBO2基因的DNA序列为模板，选择如下引物扩增：

RS-exon12-F：5'-TTTACTTCCTTGTTTTCTTG-3'，

RS-exon12-R：5'-ACCTTCAGTTTCTTTCTTTC-3'；

将所得扩增产物用限制性内切酶AluI酶切，

若只有一条带，则该突变位点处均为C碱基；

若有二条带，则突变位点处均为T碱基；

若有三条带，则说明该突变位点处一条链为C碱基，另一条链为T碱基。

4.权利要求1所述的分子标记在鸡新城疫病毒抗体水平性状方面的分子标记辅助选择中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用为在鸡新城疫病毒抗体水平选择育种中的应用。