[发明专利]一种编码巯基-二硫键氧化还原酶基因的应用有效
| 申请号： | 201310705911.X | 申请日： | 2013-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN103695453B | 公开（公告）日： | 2019-06-28 |
| 发明（设计）人： | 陆光涛;胡杰;李磊;王一诺;崔萍;陈蕾;唐纪良 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N1/21;C12R1/64 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 530004 广西壮族自治区南*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 编码 巯基 二硫键 氧化 还原酶 基因 应用 | ||
1.一种编码巯基-二硫键氧化还原酶的基因在黄原胶生产中的应用，其特征在于，所述编码巯基-二硫键氧化还原酶的基因的DNA序列如序列表中的序列1所示，所述应用为构建及选育生产黄原胶的基因工程菌，所述基因工程菌通过将携带所述基因的重组质粒pL0495导入野油菜黄单胞菌野油菜变种的野生型菌株Xcc8004获得；
所述重组质粒pL0495通过如下方法制备：根据XC_0531基因的DNA序列，设计引物C053lF：AAGCTT GCGGCAGTCAGTACTGAT；C0531R：GGATCCTCCCATGCTGAATCAAGC，引物的5′端分别加上BamHI和HindIII的酶切位点序列，以Xcc8004菌株总DNA为模板，PCR扩增该基因全长序列，将所获得的DNA片段克隆至载体pGEM3Zf(+)中，用Sanger末端中止法对所克隆的DNA核苷酸序列进行测序验证，将测序验证正确的DNA片段克隆到广谱宿主质粒pLAFR3位点上，获得含XC_0531基因的重组质粒pL0495。
2.按照权利要求1所述的应用，其特征在于，所述序列表中序列1所示的DNA序列是所述Xcc8004菌株基因组中的一段DNA序列，由2820个核苷酸组成，含完整的编码巯基-二硫键氧化还原酶的基因，自5′端的第481-2787位核苷酸为该基因的开放阅读框，自5′端的第481-483位核苷酸为该基因的起始密码子ATG，自5′端的第2785-2787位核苷酸为终止密码子TGA。
3.按照权利要求1所述的应用，其特征在于，所述基因编码的巯基-二硫键氧化还原酶的氨基酸序列如序列表中序列2所示，由768个氨基酸组成；该巯基-二硫键氧化还原酶的预测分子量为81817道尔顿，等电点为8.92。
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