[发明专利]猪呼吸与繁殖综合征病毒复制缺陷性病毒疫苗株的构建及应用有效
| 申请号： | 201310703956.3 | 申请日： | 2013-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN103773740A | 公开（公告）日： | 2014-05-07 |
| 发明（设计）人： | 宋长绪;蒋智勇;蔡汝健;李艳;刘燕玲;张乐宜 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院动物卫生研究所 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;A61K39/12;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 裘晖 |
| 地址： | 510000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 呼吸 繁殖 综合征 病毒 复制 缺陷 性病 疫苗 构建 应用 | ||
1.一种构建病毒复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株的方法，其特征在于具体包含为：将PRRSV Jiangxi-3株缺失部分Nsp9基因，得到复制缺陷性的Jiangxi-3株感染性克隆，同时将PRRSV Jiangxi-3毒株的Nsp9基因克隆入Marc-145细胞，使其稳定表达Nsp9蛋白，将复制缺陷的PRRSV Jiangxi-3株感染性克隆转染表达Nsp9蛋白的Marc-145细胞，拯救出具有复制能力的rVJiangxi-3d102毒株，获得复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株。
2.根据权利要求1所述的构建病毒复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株的方法，其特征在于：所述的PRRSV Jiangxi-3株来源于2006年“高热病”期间从江西省猪场分离鉴定，其GenBank Accession Number:EU200961.1。
3.根据权利要求1所述的构建病毒复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株的方法，其特征在于：所述的将PRRSV Jiangxi-3株缺失部分Nsp9基因为运用反向遗传操作和基因重组技术实现。
4.根据权利要求1所述的构建病毒复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株的方法，其特征在于：所述的缺失部分Nsp9基因为缺失PRRSV Jiangxi-3株基因组序列GenBank Accession Number EU200961.1的自5’末端第8241至8342位所示的102nt的核苷酸片段。
5.根据权利要求1所述的构建病毒复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株的方法，其特征在于：所述的缺失部分Nsp9基因为缺失PRRSV Jiangxi-3株基因组序列GenBank Accession Number EU200961.1的自5’末端第8241至8342位所示的102nt的核苷酸片段，并且在第8241至8342位中插入限制性内切酶位点。
6.根据权利要求5所述的构建病毒复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株的方法，其特征在于：所述的限制性内切酶位点为限制性内切酶SbfⅠ位点。
7.一种病毒复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株由权利要求1～6任一项所述的方法制备获得。
8.权利要求7所述的病毒复制缺陷性PRRSV病毒疫苗株在制备预防和/或治疗猪呼吸与繁殖综合征疫苗中的应用。
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