[发明专利]一种假丝酵母菌及一种微生物代谢制备D-缬氨酸的方法有效
| 申请号: | 201310689801.9 | 申请日: | 2013-12-12 |
| 公开(公告)号: | CN103667088A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
| 发明(设计)人: | 张春枝;毕妍;浦军平;陈莉;陈明;祖国仁 | 申请(专利权)人: | 大连工业大学 |
| 主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12P41/00;C12P13/08;C12R1/72 |
| 代理公司: | 大连智慧专利事务所 21215 | 代理人: | 刘琦 |
| 地址: | 116034 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 酵母菌 微生物 代谢 制备 缬氨酸 方法 | ||
1.假丝酵母菌(Candida sp.)DLPU-D-Val,其特征在于,保藏编号为CGMCC NO.7786。
2.权利要求1所述假丝酵母菌DLPU-D-Val在制备D-缬氨酸的应用。
3.一种微生物代谢制备D-缬氨酸的方法,其特征在于,向含有DL-缬氨酸的发酵培养基中加入假丝酵母菌体DLPU-D-Val进行有氧发酵,制得到D-缬氨酸;
所述假丝酵母菌体DLPU-D-Val保藏编号为CGMCC NO.7786。
4.根据权利要求3所述微生物代谢制备D-缬氨酸的方法,其特征在于,以体积质量百分比计所述发酵培养基成分:6-8%DL-缬氨酸,0.1~1.0%的葡萄糖或蔗糖或麦芽糖,0.2~2.0%的蛋白胨,酵母膏0.2~1.5%,0.2~0.5%磷酸氢二钾,0.3~1.0%磷酸二氢钾,0.05~0.15%硫酸镁,0.005~1.0%氯化钙,5.0~10毫克每升三氯化铁,4.0~8.0毫克每升硫酸锌;
发酵过程:将菌体加入发酵培养基中,30~32℃、300~400rpm下进行有氧发酵,过程中每隔2-4小时调节pH,使其pH维持在6.0-6.2之间,pH不再上升时结束;
发酵结束后,发酵液80-90℃杀菌30-40分钟。用离心机离心发酵液,去除菌体,发酵清液用0.5-1.0%活性炭在90-100℃脱色30-40分钟,脱色液减压浓缩,真空度大于-0.085MPa,待浓缩液中出现大量晶体时,停止浓缩,冷却到室温,抽滤,湿晶体用甲醇漂洗,90-100℃烘干得D-缬氨酸成品。
5.根据权利要求4所述微生物代谢制备D-缬氨酸的方法,其特征在于,发酵过程中调节pH选用10%硫酸。
6.根据权利要求3-5任一所述微生物代谢制备D-缬氨酸的方法,其特征在于,所述假丝酵母菌体的活化获取:
S1、配制斜面培养基,以体积质量百分比计包括:0.5%葡萄糖,1.0%蛋白胨,1.0%酵母膏,2%琼脂粉;121℃灭菌30min;
S2、将假丝酵母菌种接入所述斜面培养基中30℃、300~400rpm的条件下培养24~28h,离心取菌体。
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