[发明专利]一株高产1,3-丙二醇的微生物有效
申请号: | 201310688092.2 | 申请日: | 2013-12-16 |
公开(公告)号: | CN103740609A | 公开(公告)日: | 2014-04-23 |
发明(设计)人: | 刘德华;欧先金;孙燕 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/18;C12M1/00;C12M1/34;C12R1/22 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 李志东 |
地址: | 100084 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高产 丙二醇 微生物 | ||
1.一种分离的微生物,其于2013年7月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC NO.7824,保藏名称为ACR30。
2.根据权利要求1所述的分离的微生物,所述微生物为克雷伯肺炎杆菌。
3.一种生产PDO的方法,其特征在于,包括:
于37摄氏度,150rpm条件下,利用种子培养基将权利要求1或2所述的分离的微生物进行培养,以便获得种子培养液;以及
于37摄氏度,150-250rpm,空气0.5vvm条件下,利用发酵培养基将所述种子培养液进行发酵罐培养,并使发酵液的pH保持为6.8,以便生产所述PDO,
其中,
1L所述种子培养基中包含:
2g硫酸铵;
6.9g三水磷酸氢二钾;
2.5g磷酸二氢钾;
0.2g硫酸镁;
1g酵母粉;
30g甘油;
2.0mL微量元素溶液;以及
1.0mL铁溶液,
1L所述发酵培养基中包含:
4g硫酸铵;
0.69g三水磷酸氢二钾;
0.25g磷酸二氢钾;
0.2g硫酸镁;
1.5g酵母粉;
30g甘油;
1.5mL微量元素溶液;以及
1.5mL铁溶液,
每100mL所述种子培养基中接入所述分离的微生物的斜面菌苔1~5环,
所述种子培养液与所述发酵培养基的体积比为1:100。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,进行所述培养12小时。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,于摇瓶或发酵罐中进行所述发酵培养,
任选地,将所述摇瓶置于150rpm的摇床中进行所述发酵培养,
任选地,于所述发酵罐中进行所述发酵培养时,维持250rpm的搅拌转度,
任选地,向所述发酵液中流加浓度为40%的NaOH,以便使所述发酵液的pH保持为6.8。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,1L所述微量元素溶液中包含:
100mg四水硫酸锰;
80mg氯化锌;
40mg二水钼酸钠;
60mg硼酸;
300mg六水氯化钴;
30mg五水硫酸铜;
25mg六水氯化镍;以及
0.9mL浓度为37%的浓盐酸,
任选地,1L所述铁溶液中包含:
5.0g FeSO4·H2O;以及
4mL浓度为37%的浓盐酸。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,进一步包括:
对所述PDO进行定量定性分析,优选采用高效液相色谱仪进行所述定量定性分析。
8.一种生产PDO的系统,其特征在于,包括:
种子培养装置,所述种子培养装置用于在37摄氏度,150rpm条件下,利用种子培养基将权利要求1或2所述的分离的微生物进行培养12小时,获得种子培养液;以及
发酵培养装置,所述发酵培养装置与所述种子培养装置相连,用于在37摄氏度,150-250rpm,空气0.5vvm条件下,利用发酵培养基将所述种子培养液进行发酵培养,并使发酵液的pH保持为6.8,以便生产所述PDO,
其中,
1L所述种子培养基中包含:
2g硫酸铵;
6.9g三水磷酸氢二钾;
2.5g磷酸二氢钾;
0.2g硫酸镁;
1g酵母粉;
30g甘油;
2.0mL微量元素溶液;以及
1.0mL铁溶液,
1L所述发酵培养基中包含:
4g硫酸铵;
0.69g三水磷酸氢二钾;
0.25g磷酸二氢钾;
0.2g硫酸镁;
1.5g酵母粉;
20-50g甘油;
1.5mL微量元素溶液;以及
1.5mL铁溶液,
所述种子培养液与所述发酵培养基的体积比为1:100。
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