[发明专利]一株高产1,3-丙二醇的微生物有效

专利信息
申请号: 201310688092.2 申请日: 2013-12-16
公开(公告)号: CN103740609A 公开(公告)日: 2014-04-23
发明(设计)人: 刘德华;欧先金;孙燕 申请(专利权)人: 清华大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P7/18;C12M1/00;C12M1/34;C12R1/22
代理公司: 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 代理人: 李志东
地址: 100084 北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 高产 丙二醇 微生物
【权利要求书】:

1.一种分离的微生物,其于2013年7月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC NO.7824,保藏名称为ACR30。

2.根据权利要求1所述的分离的微生物,所述微生物为克雷伯肺炎杆菌。

3.一种生产PDO的方法,其特征在于,包括:

于37摄氏度,150rpm条件下,利用种子培养基将权利要求1或2所述的分离的微生物进行培养,以便获得种子培养液;以及

于37摄氏度,150-250rpm,空气0.5vvm条件下,利用发酵培养基将所述种子培养液进行发酵罐培养,并使发酵液的pH保持为6.8,以便生产所述PDO,

其中,

1L所述种子培养基中包含:

2g硫酸铵;

6.9g三水磷酸氢二钾;

2.5g磷酸二氢钾;

0.2g硫酸镁;

1g酵母粉;

30g甘油;

2.0mL微量元素溶液;以及

1.0mL铁溶液,

1L所述发酵培养基中包含:

4g硫酸铵;

0.69g三水磷酸氢二钾;

0.25g磷酸二氢钾;

0.2g硫酸镁;

1.5g酵母粉;

30g甘油;

1.5mL微量元素溶液;以及

1.5mL铁溶液,

每100mL所述种子培养基中接入所述分离的微生物的斜面菌苔1~5环,

所述种子培养液与所述发酵培养基的体积比为1:100。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,进行所述培养12小时。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,于摇瓶或发酵罐中进行所述发酵培养,

任选地,将所述摇瓶置于150rpm的摇床中进行所述发酵培养,

任选地,于所述发酵罐中进行所述发酵培养时,维持250rpm的搅拌转度,

任选地,向所述发酵液中流加浓度为40%的NaOH,以便使所述发酵液的pH保持为6.8。

6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,1L所述微量元素溶液中包含:

100mg四水硫酸锰;

80mg氯化锌;

40mg二水钼酸钠;

60mg硼酸;

300mg六水氯化钴;

30mg五水硫酸铜;

25mg六水氯化镍;以及

0.9mL浓度为37%的浓盐酸,

任选地,1L所述铁溶液中包含:

5.0g FeSO4·H2O;以及

4mL浓度为37%的浓盐酸。

7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,进一步包括:

对所述PDO进行定量定性分析,优选采用高效液相色谱仪进行所述定量定性分析。

8.一种生产PDO的系统,其特征在于,包括:

种子培养装置,所述种子培养装置用于在37摄氏度,150rpm条件下,利用种子培养基将权利要求1或2所述的分离的微生物进行培养12小时,获得种子培养液;以及

发酵培养装置,所述发酵培养装置与所述种子培养装置相连,用于在37摄氏度,150-250rpm,空气0.5vvm条件下,利用发酵培养基将所述种子培养液进行发酵培养,并使发酵液的pH保持为6.8,以便生产所述PDO,

其中,

1L所述种子培养基中包含:

2g硫酸铵;

6.9g三水磷酸氢二钾;

2.5g磷酸二氢钾;

0.2g硫酸镁;

1g酵母粉;

30g甘油;

2.0mL微量元素溶液;以及

1.0mL铁溶液,

1L所述发酵培养基中包含:

4g硫酸铵;

0.69g三水磷酸氢二钾;

0.25g磷酸二氢钾;

0.2g硫酸镁;

1.5g酵母粉;

20-50g甘油;

1.5mL微量元素溶液;以及

1.5mL铁溶液,

所述种子培养液与所述发酵培养基的体积比为1:100。

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