[发明专利]模式识别受体RIG-I在制备肿瘤诊断或预后评估试剂盒中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术和医学诊断领域，具体涉及模式识别受体RIG-I在制备肿瘤诊断或预后评估试剂盒中的应用。 

背景技术

在病原生物感染机体的过程中，机体的固有免疫应答首先被激活。固有免疫应答的激活主要依赖于机体免疫细胞表面的模式识别受体（Pattern recognition receptors，PRRs）对病原生物特有成分的识别。目前发现的PRR主要分为三类：1、TLRs（Toll-like receptors）；2、RLHs（RIG-I-like helicases）；3、NLRs（Nucleotide-oligomerization domain-like receptors）。在抗病毒固有免疫应答的过程中，病毒成分如DNA或RNA等能够被免疫细胞的TLRs和RLHs识别，进而活化下游信号途径，促使免疫细胞活化并表达促炎症细胞因子和Ⅰ型干扰素，提高细胞的抗病毒活性并能促使病毒感染细胞的凋亡，从而发挥清除病毒感染的作用（Takeuchi,O等，MDA5/RIG-I and virus recognition.Curr Opin Immunol.2008,20:17-22）。 

RLHs是细胞内识别病毒RNA的主要受体，主要有两个成员：RIG-I(retinoic acid-inducible gene I)和MDA5(melanoma differentiation-associated gene5)。RLHs的分子结构由两部分组成：N端的CARDs（caspase-recruitment domains）和C端的RNA解螺旋酶结构域。RNA解螺旋酶结构域主要司职病毒RNA的识别，其结构与Dicer酶相似。CARDs结构域主要司职与下游接头分子结合，进而传导活化信号。在病毒感染或Ⅰ型干扰素刺激的条件下，RLHs的表达能够被显著活化，进而发挥增强病毒RNA识别及活化其下游抗病毒信号途径的作用，达到清除病毒感染的目的(Meylan E等，Toll-like receptors and RNA helicases:two parallel ways to trigger antiviral responses.Mol Cell.2006,22:561-569)。 

以往研究认为，RIG-I主要识别病毒复制的产物dsRNA。然而，目前研究表明，5’端磷酸化的病毒RNA才是RIG-I识别的主要配体。事实上，绝大多数胞内感染病毒来源的RNA5’端都要经过磷酸化修饰，RIG-I也正是通过识 别RNA的5’端是否有磷酸化修饰来区分来源于自我和非我的RNA。然而，机体自身表达的RNA最初也有5’端的磷酸化修饰，但自身RNA表达都须在核内进行剪切或修饰，如mRNA需在5’端进行甲基化加帽修饰、tRNA需经过5’端的剪切、核糖体RNA需与核糖体蛋白结合等。因此，在正常情况下机体自身来源的RNA均不会在胞浆中激活RIG-I信号。但是，机体内仍存在少量5’端磷酸化的自身RNA，这些自身RNA如何实现逃避RIG-I识别的机制还不十分清楚(Yoneyama M等，Function of RIG-I-like receptors in antiviral innate immunity.J Biol Chem.2007,282:15315-15318)。此外，RIG-I和MDA5虽然同为RLHs家族病毒RNA识别受体，但它们识别的病毒种类不尽相同。RIG-I主要识别的病毒包括水泡性口炎病毒（VSV）、新城鸡瘟病毒（NDV）、仙台病毒（SeV）、流感病毒（influenza virus）和乙型脑炎病毒（JEV）等；而MDA5主要识别小核糖核酸病毒，包括脑心肌炎病毒（EMCV）、脑脊髓炎病毒（Theiler’s virus）和门戈病毒（Mengo virus）等(Kato H等，Differential roles of MDA5and RIG-I helicases in the recognition of RNA viruses.Nature.2006,441:101-105)。