[发明专利]一种快速鉴别普通高温放线菌的特异PCR方法无效
| 申请号： | 201310678186.1 | 申请日： | 2013-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN103614487A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 程池;赵纪文;姚粟;信春晖;李辉;刘勇;张明娟 | 申请（专利权）人： | 中国食品发酵工业研究院;山东扳倒井股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100015 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 鉴别 普通 高温 放线菌 特异 pcr 方法 | ||
1.一种普通高温放线菌的快速鉴别方法，其特征在于：经过简单的PCR反应，可以快速鉴别普通高温放线菌。
2.按照权利要求1所述的普通高温放线菌快速鉴别方法，其特征在于：用于鉴别普通高温放线菌的特异引物为：
上游引物109F：5'-GCGTGACGGGAAAATCTATC-3'
下游引物801R：5'-CATCACGGCTTTGTTAATAATC-3'。
3.按照权利要求2所述的普通高温放线菌快速鉴别方法，其特征在于：PCR反应体系为50 μl，其中10×Taq reaction buffer 5.0 μL，引物（10μmol/L）各1.0 μl，10 μmol/L 的dNTP 4.0 μL，2.5U的Taq酶0.6 μL，DNA模板1.0 μL，dd H2O 37.4 μL。
4.按照权利要求3所述的普通高温放线菌种快速鉴别方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应条件分别为：95℃预变性5 min，进入循环：94℃变性30s，48℃复性30s，72℃延伸80s，共35个循环，然后72℃延伸10min。
5.按照权利要求4所述的普通高温放线菌快速鉴别方法，其特征在于：PCR扩增产物采用1%的琼脂糖凝胶进行检测。
6.按照权利要求5所述的普通高温放线菌快速鉴别方法，其特征在于：在733 bp处有电泳条带的菌株为普通高温放线菌。
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