[发明专利]一种林可霉素化学发光酶联免疫快速检测试剂盒在审
申请号: | 201310673629.8 | 申请日: | 2013-12-12 |
公开(公告)号: | CN103675286A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 王善普;李秀梅;王兴兵;靳婉霞;王宇东 | 申请(专利权)人: | 洛阳莱普生信息科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N21/76 |
代理公司: | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人: | 时国珍 |
地址: | 471000 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 林可霉素 化学 发光 免疫 快速 检测 试剂盒 | ||
1.一种林可霉素化学发光酶联免疫快速检测试剂盒,包括盒体、设在盒体内的酶标板和设在盒体内试剂,其特征在于:所述酶标板的各孔包被有包被抗原,其中包被抗原由林可霉素的代谢物与卵清蛋白偶联制成;所述试剂包括:林可霉素的单克隆抗体、酶标二抗、林可霉素系列标准溶液、浓缩磷酸盐缓冲液、浓缩洗涤液和发光液,所述的酶标二抗为辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体。
2.如权利要求1所述的林可霉素化学发光酶联免疫快速检测试剂盒,其特征在于:所述酶标板为不透明的聚苯乙烯8孔×12条的96孔化学发光酶标板。
3.如权利要求1所述的林可霉素化学发光酶联免疫快速检测试剂盒,其特征在于:所述包被抗原浓度为5μg/ml。
4.如权利要求1所述的林可霉素化学发光酶联免疫快速检测试剂盒,其特征在于:所述林可霉素的单克隆抗体是由林可霉素的代谢物与分子量范围是6.7KDa~6.8 KDa的牛血清蛋白偶合制成的偶联物作为免疫原免疫小鼠制备得到的单克隆抗体,其工作浓度为1:15000。
5.一种利用权利要求1所述的林可霉素化学发光酶联免疫快速检测试剂盒检测残留林可霉素抗生素的方法,使用林可霉素系列标准溶液浓度分别为:0.1ng/mL(0标准)、0.5ng/mL、0.8ng/mL 、lng/mL、5ng/mL、10ng/mL,其特征在于:包括以下步骤:
1)加样:按照50μL/孔的加入量,向酶标板的孔中分别加入林可霉素系列标准浓度溶液和样品溶液,然后按照50μL/孔的加入量,向各孔中加入林可霉素抗体工作液,之后室温恒温孵育2.5h;
2)洗涤:倾出孔中液体,向酶标板中加入280μL/孔的洗涤液,静置5min后拍干,重复三次;
3)加酶标二抗:每孔加入酶标二抗工作液100μL,室温恒温孵育1.5h;
4)洗涤:倾出孔中液体,向酶标板中加入280μL/孔的洗涤液,静置5min后拍干,重复三次;
5)加发光液:每孔加入发光液100μL;
6)检测:用化学发光免疫分析仪测定每孔的发光强度;
7)结果判定:以所测得的林可霉素系列标准浓度溶液对应的孔的发光值,除以第一个标准(0标准)的发光值再乘以100,得到抑制率B/B0%,以抑制率为纵坐标,各林可霉素系列标准浓度溶液浓度的对数为横坐标作标准曲线,根据样品溶液所对应的孔的发光值和所得标准曲线,计算得到样品溶液的浓度。
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