[发明专利]一种水稻米糠脂肪酶提取、保存方法

权利要求书

1.一种水稻米糠脂肪酶提取、保存方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）米糠脱脂：取一定量的米糠置于具盖的密封容器中，按每1g米糠对应3ml正己烷的比例，加上相应的正己烷，混匀后，放置于能前后左右振荡的水平振荡器上，以170-190r/min的振荡速率振荡25-35min，进行脱脂后，再充分过滤，弃过滤液，将滤渣内米糠颗粒取出，放入开口容器中，常温下放置4-8小时，每1小时搅拌3-4次，使正己烷充分挥发，干燥待用；

（2）脂肪酶提取：待脱脂后的米糠颗粒充分干燥后，称取一定量的脱脂米糠置于具盖的密封容器中，按每1g米糠对应8ml去离子水或蒸馏水的比例，加上相应的去离子水或蒸馏水，并置于能前后左右振荡的水平振荡器上，以170-190r/min的振荡速率振荡25-35min，再2-6℃、2000-4000rpm/min冷冻离心25-35min后，取上清液至另一容器中保存，即为粗酶提取液；

（3）脂肪酶比活力测定：粗酶液酶活力测定按照ZL200610097523.8的方法进行；粗酶液蛋白含量测定按蛋白质浓度测定的紫外吸收法进行；最后根据酶总活力/蛋白含量的比值，计算脂肪酶比活力；

（4）米糠脂肪酶保存：将粗酶提取液制成冷干粉，或利用50 mM pH 7.0磷酸缓冲液进行保存。

2.根据权利要求1所述的一种水稻米糠脂肪酶提取、保存方法，其特征在于，步骤（4）所述的磷酸缓冲液中包含有0.5mM氯化钙。