[发明专利]一种复合型可降解的抗菌人工硬脑膜及其制备方法

权利要求书

1.一种复合型可降解的抗菌人工硬脑膜，包含万古霉素或盐酸氧氟沙星注射液，壳聚糖及β-甘油磷酸钠，其特征是：将脱细胞膜状生物衍生材料制成海绵状胶原生物膜支架，应用2%(w/v)壳聚糖溶液8ml，56%(w/v)β-甘油磷酸钠溶液1ml进行混合，根据壳聚糖与β-甘油磷酸钠溶液复合物在37℃时形成水凝胶的温度敏感性的特性，将0.1g万古霉素或0.1g盐酸氧氟沙星注射液lml加入壳聚糖与β-甘油磷酸钠溶液复合物的溶液浸入已经制成的海绵状胶原生物膜支架的免缝合硬脑膜，在37℃温箱内放置10min，水凝胶复合物均匀浸入海绵状胶原生物膜支架形成具有抗菌活性的可吸收的人工硬脑膜。

2.根据权利要求1所述的一种复合型可降解的抗菌人工硬脑膜，其特征是：脱细胞膜状生物衍生材料包括牛肌腱、猪心包、牛心包、羊心包、牛腹膜、猪腹膜、牛肠、猪肠和羊肠中的任意一种。

3.根据权利要求1所述的一种复合型可降解的抗菌人工硬脑膜的制备方法，其特征是，它包括以下步骤：

1）海绵状胶原生物膜支架的制备；利用胶原膜冷冻干燥后制备而成，具有多孔疏松状结构，具有良好的渗透和吸水能力，采用脱细胞膜状生物衍生材料置于75%乙醇溶液及过氧乙酸中浸泡消毒2h，用磷酸盐缓冲液反复冲洗3次；将其置于氢氧化钠溶液浸泡2h，再用磷酸盐缓冲液冲洗浸泡至PH7.4；将其放在-80℃低温液氮中冷冻24 h，置于真空冻干机冷冻干燥 24 h，液氮冷冻粉碎机粉碎40 min，9号筛网取粒径 80 μm 以下胶原微粒，将胶原微粒与 0.5% 胰蛋白酶、0.2%乙二胺四乙酸即EDTA按体积比 1 ∶5混合，4 ℃冰箱振荡 24 h，以离心半径 8 cm，5000 r/min 离心20 min 弃去上清液体；磷酸盐缓冲液 反复清洗 3 次，同上法离心后弃上清液，将离心后胶原微粒与 1 mol/L冰醋酸按体积比1∶5混合，胶原微粒与胃蛋白酶按质量比100∶ 1混合，4℃冰箱连续振荡 24h，去除胶原微粒中胶原分子的非螺旋区，用 1 mol/L氢氧化钠调节 pH 值至 7.4，以离心半径 8 cm，5000 r/min 离心20 min；弃去上清液体，三蒸水反复清洗 3 次，以离心半径 8 cm，5000 r/min 离心20 min；弃去上清液体，沉淀物置于特制的圆柱形模具中，规格有6cm×6cm；8cm×8cm；10cm×10cm；12cm×120cm，厚度2-4毫米，以真空冻干机冷冻干燥，-80℃低温液氮中冷冻24 h后，置于冷冻干燥机成型 24 h后取出，获得脱细胞海绵状胶原生物膜，真空包装，环氧乙烷灭菌，4℃冰箱保存备用；

  2）壳聚糖/β-甘油磷酸钠复合物的制备：取36%浓盐酸0.43ml,加三蒸水至总液量为50ml，取0.43ml盐酸加入三蒸水的50ml容量瓶中,加三蒸水定容为50毫升，配制成0.1M的稀盐酸，壳聚糖规格是:粘度150mPa.s,分子量8.13万道尔顿,脱乙酞度91%，2g壳聚糖溶解于0.1M的稀盐酸,23℃室温下以磁力搅拌器充分搅拌30分钟，转速450r/min，混匀制成总量100ml溶液,制备成2%(w/v) 壳聚糖溶液，121℃高压消毒30min,4℃冰箱保存备用，56%(w/v)β-甘油磷酸钠溶液配制56gβ-甘油磷酸钠,加三蒸水完全溶解,定容至100ml,过滤除菌, 121℃高压消毒30min，4℃冰箱保存备用，2%(w/v)壳聚糖与56%(w/v) β-甘油磷酸钠以8:1的比例配制，pH值为7.25，37℃水浴中成为水凝胶时间为6分钟；

3）取2%(w/v)壳聚糖溶液8ml：56%(w/v)β-甘油磷酸钠溶液1ml：0.1g万古霉素或0.1g盐酸氧氟沙星注射液lml，三者在4℃均匀混合后，以脱细胞海绵状胶原生物膜浸入上述混合溶液，在37℃温箱内放置10分钟，混合溶液形成水凝胶与胶原生物膜融为一体。