[发明专利]鸡抗菌肽β-防御素重组蛋白CBD的制备方法在审
| 申请号： | 201310654728.1 | 申请日： | 2013-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN103710349A | 公开（公告）日： | 2014-04-09 |
| 发明（设计）人： | 段升华 | 申请（专利权）人： | 中山奈德生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/11;C12N15/63;C07K14/465 |
| 代理公司： | 中山市铭洋专利商标事务所(普通合伙) 44286 | 代理人： | 邹常友 |
| 地址： | 528403 广东省中山市火*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗菌 防御 重组 蛋白 cbd 制备 方法 | ||
1.鸡抗菌肽β-防御素重组蛋白CBD基因，其特征在于：所述基因序列如SEQ ID NO：1。
2.根据权利要求2所述鸡抗菌肽β-防御素重组蛋白CBD蛋白，其特征在于：所述蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：2。
3.一种克隆抗菌肽β-防御素重组蛋白CBD基因的引物，其特征在于：所述引物序列如下：
SEQ ID NO：35’-ATGACGCTCATCATGATCGT-3’
SEQ ID NO：45’TGATGTATAGATTGGTCATG-3’。
4.一种鸡抗菌肽β-防御素重组蛋白CBD的制备方法，其特征是，包括如下步骤：
(1)鸡β-防御素基因CBD的克隆及测序；
(2)表达载体的构建与鉴定；
(3)重组蛋白的融合表达；
(4)重组蛋白的鉴定；
(5)表达产物的可溶性分析；
(6)融合蛋白的纯化；
(7)鸡重组蛋白的生物学活性检测。
5.根据权利要求2所述制备鸡抗菌肽β防御素重组蛋白CBD的方法，其特征在于：所述步骤(1)鸡β-防御素基因CBD的克隆及测序包括如下步骤：
①从鸡睾丸组织中提取总RNA，然后将总RNA反转录成cDNA；
②设计引物及PCR反应，利用Primer5.0软件设计引物：
SEQID NO：35’-ATGACGCTCATCATGATCGT-3’
SEQ ID NO：45’-TGATGTATAGATTGGTCATG3’
用cDNA为模板进行梯度PCR操作扩增鸡抗菌肽β-防御素重组蛋白CBD基因序列，PCR反应体系为25μL体系，反应条件为95℃预变性5min，94℃变性30s，55℃退火45s，72℃延伸2min，共35个循环，而后72℃延伸7min；
③、PCR产物的回收和纯化；
④、克隆；
⑤、测序鉴定。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中山奈德生物科技有限公司，未经中山奈德生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310654728.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种适用于海洋环境的耐腐蚀钢管
- 下一篇：多用废油回收器
