[发明专利]一种三花注射液的质量控制方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种三花注射液的快速质量控制方法及应用。

背景技术

三花注射液是中药复方制剂，由三七总皂苷(原药材为三七)及灯盏花素(原药材为灯盏细辛)中药提取物组成。三七总皂苷原料来源为五加科植物三七的根中提取出来的皂苷类成分。味甘，微苦，性温。归肝、胃、心、肺、大肠经。其功能主治为止血散瘀，消肿定痛。《中华本草5》收载了三七，载其功能为止血散瘀、消肿定痛。主治各种出血证，跌扑瘀肿，胸痹绞痛，癥瘕，血瘀经闭、痛经，产后瘀阻腹痛，疮痈肿痛。《本草纲目》载其：止血、散血、定痛。《医便》载其：专治血，归经络。《本草新编》载其：三七根，止血之神药也。无论上中下之血，凡有外越者，一味独用亦效。《本草求真》中指出：三七气味苦温，能于血分化其血瘀。《衷中参西录》中载其：三七，善化瘀血，又善止血妄行。近年来，在三七总皂苷治疗心血管疾病方面进行了较多的基础与临床研究，三七总皂苷具有多方面的生物活性，是防治心血管疾病的一种有效药物，其作用主要表现在强心、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、改善心肌代谢、抗自由基、抗凝、钙拮抗等方面。灯盏花素(灯盏花黄酮)是灯盏细辛(灯盏花)的有效成分，灯盏细辛为菊科植物短葶飞蓬的干燥全草。味辛、微苦，温。入肺、胃、肝经。其功能主治为散寒解表，祛风除湿，活络止痛，消积。主治感冒，风湿痹痛，瘫痪，胃痛，牙痛，小儿疳积，骨髓炎，跌打损伤。其主要成分为黄酮，内酯，挥发油，氨基酸等，有效成份主要是4-羟基黄芩素(Scutellarein)等。临床上主要用于治疗缺血性心脏疾病、脑血栓及脑梗塞等。两药合用，具有活血化瘀、通络止痛功效，用于治疗心血瘀阻，脑梗塞(缺血性脑卒中)急性期及恢复期；冠心病、心绞痛。

三花注射液作为一种中药复方制剂，由于其复方内部的不同药味组合间的有机配合关系形成了复方整体综合的治疗特征，复方的质量优劣难以以明确的指标进行评价，复方的质量不稳定，直接引起了治疗效果的不稳定。中药特征图谱的研究和建立正是为了解决中药质量控制和监督这一关键问题而采取的一种方法，它从药材的生产、加工、贮存及制剂的原料、中间品、成品等各个角度和方面，进行中药样品分析，通过相似性和相关性对比，发现质量变异和缺陷，从而全面、特异地把握住中药制剂的质量命脉。

目前，三花注射液的质量控制方法仍存在一定不足，中国专利CN1939372A公开了一种三花注射液的指纹图谱质量控制方法，但该方法采用2种高效液相色谱法分别测定三七总皂苷中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁以及灯盏花素中野黄芩苷的含量，操作繁琐，检测时间长。

林燕芝公开了一种三花注射剂的指纹图谱质量控制方法(三花注射剂质量评价方法研究，2004年硕士论文)，该方法的不足之处在于，1、高效液相色谱分析耗时60分钟，分析时间较长，耗能不环保。2、人参皂苷Rg1与人参皂苷Re的分离度不好，只有0.97，不能达到含测要求。3、基线漂移，且很多共有峰堆积在一起，没有达到有效分离。

因此，目前仍然缺少一种快速、有效的三花注射剂的指纹图谱质量控制方法。

发明内容

本发明的目的是克服上述现有技术中的不足之处，提供一种快速、有效的三花注射液的质量控制方法及应用。

本发明采用快速HPLC梯度洗脱在一个流动相系统利用相同检测波长，同时检出复方中的两种原料共6种成分含量，建立的特征图谱可以全面监控原料、半成品和成品的质量，通过色谱特征图谱相的比较，评价优劣、考察稳定性和一致性，弥补了原质量控制方法的不足。

本发明涉及的三花注射液的质量控制方法，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：取野黄芩苷对照品5mg、三七总皂苷对照提取物100mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加甲醇70ml超声处理(功率300W，频率50kHz)45分钟，取出，放置室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

(2)供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品内容物40mg，精密称定，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；

(3)快速高效液相色谱检测：精密吸取对照品溶液及供试品溶液各2μl，分别注入液相色谱仪，进行HPLC检测，色谱条件为：色谱柱为SUPELCO Express C18(5cm×4.6mm，2.7μm)；以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱；流速：0.8ml／min；柱温：25℃；以DAD检测器，检测波长为203nm；