[发明专利]用于检测GDNF剪接变异体2、4的实时荧光定量PCR专用引物及方法有效
| 申请号： | 201310648187.1 | 申请日： | 2013-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN103614481A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 李亨;高殿帅;张宝乐;柴祥;何涛 | 申请（专利权）人： | 徐州医学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 高桂珍 |
| 地址： | 221000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 gdnf 剪接 异体 实时 荧光 定量 pcr 专用 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.用于检测GDNF剪接变异体2、4的实时荧光定量PCR专用引物及方法，其特征在于：实时荧光定量PCR专用引物，主要用于检测人组织或细胞内剪接变异体2（Gene code NO.： NM_001190469.1）和剪接变异体4（Gene code NO.: NM_199231.2）表达量，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和 SEQ ID NO.2所示。
2.用于检测GDNF剪接变异体2、4的实时荧光定量PCR专用引物及方法，其实时荧光定量PCR方法，主要用于检测人组织或细胞内pre-(β)pro-GDNF实时荧光定量检测的方法，其特征在于：应用LightCycler??480 System Real Time PCR扩增仪，95℃预变性30 秒，1 Cycle；95℃变性5秒，60℃退火20秒，72℃延伸10秒，40 Cycles；本发明提供的优选配制 PCR 反应液，包括：SYBR??Premix Ex Taq（TAKARA DRR041A）10 μl，PCR Forward Primer（SEQ ID NO.1，10 μM）0.5 μl, PCR Reverse Primer（SEQ ID NO.2，10 μM）0.5 μl，cDNA模板 1μl，dH2O 8μl。
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