[发明专利]猪PDLIM3蛋白三种亚型超表达载体的构建和应用

权利要求书

1.作为猪PDLIM3基因三种转录本，它们的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所述。

2.猪PDLIM3基因三种转录本真核重组质粒，其特征在于由序列表中SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所述的猪PDLIM3基因三种转录本的核苷酸序列和pEGFP-N1载体构建而成，其中利用带有保护性碱基、末端分别带有EcoR1和BamH1限制性内切酶酶切位点的引物进行PCR扩增，PCR反应的正、反向引物DNA序列如下所示：

正向引物（F1）： 5- CGGAATTCATGCCCCAAAACGTGATC-3

反向引物（R1）：5- CGGGATCCTGAGCTTTGGGATAGAGAGT-3。

3.制备如权利要求2所述的真核重组质粒的方法，按照以下步骤：

   （1）以猪肌肉的cDNA为模板，PCR扩增猪PDLIM3基因的三种转录本；

（2）用EcoR1和BamH1限制性内切酶分别对纯化后的猪PDLIM3基因的三种转录本和pEGFP-N1质粒进行双酶切，用连接酶T4 DNA Ligase进行酶连接，然后将连接产物转化大肠杆菌DH5α，涂布加有Kan抗生素的平板，筛选阳性克隆。

4.依据权利3所述方法获得的猪PDLIM3基因三种转录本真核表达载体，在猪PDLIM3蛋白三种亚型亚细胞定位分布中的应用。