[发明专利]纯化水溶性纳米银颗粒鼠源性IgG类单抗偶联物方法

权利要求书

1.一种纯化水溶性纳米银颗粒鼠源性IgG类单抗偶联物方法，其特征在于包括以下步骤：（1）将水溶性羧基修饰的纳米银颗粒活化，加入鼠源性IgG类单克隆抗体溶液，调整溶液pH至7.0～9.0后，偶联反应；（2）偶联反应结束后，溶液中加入氨基葡萄糖封闭偶联产物中纳米银颗粒表面残留的羧基，将反应溶液pH值调整至弱酸性；（3）高速离心，弃上清液，取沉淀。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（3）后，还有将沉淀用含25%甘油，0.01% NaN₃的0.05 mol/L pH 7.0～7.5磷酸盐缓冲液溶解步骤。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于水溶性纳米银颗粒为核壳结构的纳米银颗粒，壳层由双亲聚合物组成，外部为大量亲水羧基表面，内层为长链疏水基团通过与三辛基氧化磷的疏水作用将油溶性纳米银颗粒包裹在壳层内部。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（1）中活化为将水溶性羧基修饰的纳米银颗粒溶解于pH 5.0～6.0，0.05 mol/L硼酸盐缓冲液中，分别加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺以及N-羟基硫代琥珀酰亚胺，37℃反应2小时，活化纳米银颗粒羧基。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺以及N-羟基硫代琥珀酰亚胺与纳米银颗粒的摩尔比均为100～200：1，优选为150:1；所述鼠源性IgG类单克隆抗体与纳米银颗粒的摩尔比为1～10：1。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于偶联反应结束后，溶液中加入氨基葡萄糖至氨基葡萄糖终浓度为1.5～3%，充分混匀15～30分钟。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（2）中将反应溶液pH值调整至弱酸性为将pH值调整至4.5～5.0，优选为5.0。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（3）所述高速离心离心力为28，000～30，000g。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述鼠源性IgG类单克隆抗体为抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体、抗赭曲霉毒素单克隆抗体、抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体、抗恩诺沙星单克隆抗体、抗盐酸克伦特罗单克隆抗体、抗沙丁胺醇单克隆抗体、抗孔雀石绿单克隆抗体、抗莱克多巴胺单克隆抗体、抗沙门氏菌单克隆抗体、抗志贺氏菌单克隆抗体、或抗空肠弯曲菌单克隆抗体。