[发明专利]高效纯化量子点与IgG类单克隆抗体偶联物的方法有效
| 申请号: | 201310637480.8 | 申请日: | 2013-12-03 | 
| 公开(公告)号: | CN103665159A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 | 
| 发明(设计)人: | 熊勇华;许恒毅;罗薇;许杨;魏华;徐威 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 | 
| 主分类号: | C07K16/14 | 分类号: | C07K16/14;C07K16/44;C07K16/12;C07K1/13 | 
| 代理公司: | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人: | 施秀瑾 | 
| 地址: | 330031 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 高效 纯化 量子 igg 单克隆抗体 偶联物 方法 | ||
1.纯化量子点与IgG类单克隆抗体偶联物的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将水溶性羧基修饰的量子点活化,加入IgG类单克隆抗体溶液,调整溶液pH至7.0~9.0后,偶联反应;(2)偶联反应结束后,溶液中加入氨基葡萄糖封闭偶联产物中量子点表面残留的羧基,将反应溶液pH值调整至弱酸性;(3)高速离心,弃上清液,取沉淀。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(3)后,还有将沉淀用含25%甘油,0.01% NaN3的0.05 mol/L pH 7.0~7.5磷酸盐缓冲液溶解步骤。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于所用量子点为羧基化两亲聚合物修饰的水溶性羧基量子点。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(1)中活化为将水溶性羧基修饰的量子点溶解于pH 5.0~6.0,0.05 mol/L硼酸盐缓冲液中,分别加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺以及N-羟基硫代琥珀酰亚胺,37℃反应2小时,活化量子点羧基。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺以及N-羟基硫代琥珀酰亚胺与量子点的摩尔比均为100~200:1,优选为150:1;所述IgG类单克隆抗体与量子点的摩尔比为1~10:1。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于偶联反应结束后,溶液中加入氨基葡萄糖至氨基葡萄糖终浓度为1.5~3%,充分混匀15~30分钟。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(2)中将反应溶液pH值调整至弱酸性为将pH值调整至4.5~5.0,优选为4.5。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(3)所述高速离心离心力为28,000~30,000g。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述IgG类单克隆抗体为抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体、抗赭曲霉毒素单克隆抗体、抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体、抗恩诺沙星单克隆抗体、抗盐酸克伦特罗单克隆抗体、抗沙丁胺醇单克隆抗体、抗孔雀石绿单克隆抗体、抗莱克多巴胺单克隆抗体、抗沙门氏菌单克隆抗体、抗志贺氏菌单克隆抗体、或抗空肠弯曲菌单克隆抗体。
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