[发明专利]一种抗肿瘤基因磁性复合纳米颗粒及制备方法

权利要求书

1.一种抗肿瘤基因磁性复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：

1）以pIRES-CMVE-Egr1p真核表达质粒为模板，进行聚合酶链式反应，得到辐射诱导启动子片段，将其亚克隆至pCDNA3.1-EGFP质粒上，得到pCDNA3.1-Egr1-EGFP真核表达质粒；

2）以载有热启动子和自杀基因的质粒为模板，进行聚合酶链式反应，得到热启动子片段和抗肿瘤基因片段；

3）将抗肿瘤基因片段亚克隆至所述步骤1）中得到的pCDNA3.1-Egr1-EGFP真核表达质粒中，取代EGFP，得到pCDNA3.1-Egr1- HSV-TK真核表达质粒；

4）将热启动子片段亚克隆至所述pCDNA3.1-Egr1-HSV-TK真核表达质粒上，得到pCDNA3.1-Egr1- Hsp70- HSV-TK真核表达质粒； 

5）按多聚乙烯亚胺负载的Mn_0.5Zn_0.5Fe₂O₄纳米粒与pCDNA3.1-Egr1-Hsp70- HSV-TK真核表达质粒质量比为20：1~50：1，将二者分别用无血清培养基稀释，室温放置5分钟以上，然后将二者的稀释溶液混和均匀，室温下孵育30分钟以上，获得pEgr1-Hsp70-HSV-TK/PEI-MZF-NPs复合物，即为抗肿瘤基因磁性复合纳米颗粒。

2.一种抗肿瘤基因磁性复合纳米颗粒，其特征在于，该复合纳米颗粒按照权利要求1所述方法制备得到。