[发明专利]一种流加预处理固态发酵油料作物辅助冷榨提油的工艺

权利要求书

1.一种提升菌株在固态发酵中所产酶活辅助提升冷榨提油出油率的工艺技术，其特征在于包括以下步骤：（1）利用市售大豆或大豆片作为发酵基质，清理后的原料分装灭菌；（2）调配发酵基质的营养成分，添加微量元素，接种菌株种子液，并流加碳源、氮源进行发酵；（3）发酵结束后烘干发酵产物进行冷榨提油。

2.权利要求1中所述方法，其特征在于：步骤（1）中，所用原料为市售大豆片，也可用花生、芝麻、亚麻籽、向日葵等其他食用油料作物进行发酵;权利要求1中所述方法，其特征在于：发酵原料分装于500ml三角瓶中，装量50g，高压灭菌锅内于121℃下灭菌15～20min，或采用其他灭菌方式至等效灭菌强度。

3.根据权利要求1中所述方法，其特征在于：所述步骤（2）中，发酵条件为：产酶时间为49.16h，水分添加量为29.96%，发酵温度为37.23℃，接种量为8.01%；微量元素添加比例分别为：Mg²⁺（25.30mg/kg）、Zn²⁺（10.36mg/kg）、Fe²⁺（5.55mg/kg）、K⁺（14.95mg/kg）。

4.根据权利要求1中所述方法，其特征在于：所述步骤（2）中，所采用的发酵菌株为少孢根霉，采用平板分离对菌株进行分离活化后接种于PDA斜面固体培养基，种子液采用PDA液体培养基;PDA固体培养基：土豆洗净去皮，称取100g切成小块，加蒸馏水煮沸20—30min，以8层纱布过滤后加热，加琼脂10g，继续加热搅拌混匀，琼脂完全溶解后，加葡萄糖10g，搅拌溶解后补足蒸馏水至500ml，分装后121℃灭菌20min后，取出冷却凝固备用；PDA液体培养基：土豆洗净去皮，称取100g切成小块，加蒸馏水煮沸20—30min，以8层纱布过滤后加热，加葡萄糖10g，搅拌溶解后补足蒸馏水至500ml，分装于500ml三角瓶内，100ml/瓶，密封后，121℃下灭菌20min备用，从少孢根霉斜面培养基挑取2～3环纯化菌体接入PDA液体种子培养基，于35～37℃摇床200rpm/min培养16—24h后备用。

5. 根据权利要求1中所述方法，其特征在于：所述步骤（2）中，碳源氮源采用流加的方式逐步加入培养基内，外加碳源选用葡萄糖，外加氮源选用蛋白胨，以补加的方式进行流加，具体为以下步骤：碳源的初始添加量为基质干重的4%，添加方式为分二次补加，发酵到12h进行一次补加，补加碳源含量至占基质干重的6%，发酵进行到24h进行第二次补加，补加碳源含量至占基质干重的8%；氮源的初始添加量为0.5%，添加方式为分三次补加，发酵到12h进行一次补加，补加氮源含量至占基质干重的1%，发酵进行到24h进行第二次补加，补加氮源含量至占基质干重的1.5%，发酵进行到36h进行第三次补加，补加氮源含量至占基质干重的2%，继续12h完成发酵。

6. 根据权利要求1中所述方法，其特征在于：所述步骤（2）中，发酵结束后，改变温度至45℃，继续对物料进行酶解12h。

7. 根据权利要求1中所述方法，其特征在于：所述步骤（3）中，烘干采取50℃，于恒温干燥箱内连续烘干24h后，投入冷榨机内进行冷榨。

8. 根据权利要求1中所述方法，其特征在于：所述步骤（2）中，发酵进行至48h后，测定纤维素酶活达到11016U/ml，蛋白酶活性达到2610U/ml，溶剂浸提压榨后饼粕残油为26.4%，同时压榨未经发酵处理的豆片，测定残油为38%，相比之下，经发酵预处理的豆片冷榨出油率提高了11.6个百分点。

9. 根据权利要求1中所述方法，其特征在于：所得压榨油色泽金黄，具有类似芝麻油的特殊香气，无豆腥味，品质均一稳定。

10.权利要求1—9任意一项所述工艺方法制备的植物油脂。