[发明专利]一种链霉菌及利用其制备两种抗生素的方法

说明书

技术领域

本发明属于工业微生物领域，具体涉及一种能够产生抗生素的链霉菌Strepomyces sp. PRh5新种，以及利用该菌制备抗生素尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)的方法。

背景技术

化合物尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素(Nocardamine) 结构式如图1所示。尼日利亚菌素(nigericin)属于聚醚类抗生素(Poly ethers)。大多数聚醚类抗生素都能通过形成亲脂混合物携带一价阳离子穿过生物膜，并作为抗球虫剂和牲畜生长促进剂应用于农业生产中Nigericin能够改善家畜对蛋白质的利用率，并具有较好的抗球虫活性。另外，nigericin还具有抗菌、抗肿瘤、抗HIV病毒活性，如酸热芽孢杆菌，蜡状芽孢杆菌，金黄色葡萄球菌等。

化合物诺卡胺素 (Nocardamine), 属于大环内酯化合物，诺卡胺素 (Nocardamine)有抗菌尤其是抗四环素耐药菌株的活性，诺卡胺素 (Nocardamine)还能诱导昆虫BM—N4细胞的形态发生改变，其抗菌作用在于它是一种非常强的铁铬合剂, 许多微生物不能从诺卡胺素 (Nocardamine)一铁一铬合物中转运铁。诺卡胺素 (Nocardamine)除在其产生菌细胞中起运载铁的作用外,对其它微生物也有抗菌作用，例如分支杆菌。

 

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种链霉菌Strepomyces sp. PRh5，命名为链霉菌PRh5（Strepomyces sp. PRh5），其保藏号为：CCTCC NO：M 2013487，在国家知识产权局指定的保藏单位保藏，保藏日期为2013年10月23日，保藏单位名称：中国典型培养物保藏中心。

本发明的链霉菌Strepomyces sp. PRh5是从东乡野生稻根际分离获得。东乡野生稻，是迄今为止发现的纬度最高，分布最北的野生稻，仅分布于海拔48.6 m的江西省东乡县岗上积镇庵家山地区（28°14′ N、116°36′ E），是我国三大普通野生稻之一。常规PCR扩增PRh5的16S rDNA并测序，其序列如SEQ ID NO.1所示，而后提交到GenBank中，得到序列号JQ009377。16S rDNA基因序列分析结果显示该菌株与Streptomyces indonesiensis DSM41759T的相似度为98.31%。通过邻接法清晰地揭示了该菌株与一组链霉菌菌属物种的系统进化关系（图2），表明该菌属于链霉菌菌属的一种。为了进一步确定菌株PRh5的种的分类地位与Streptomyces indonesiensis DSM 41759T DNA- DNA杂交实验结果为54.6%，低于70% (Stackebrandt，E.&Ebers，J. Taxonomic parameters revisited：tarnished gold standards Microbiol Today. 2006，33，152-155.) 这一基因种的区分界限，因此我们确定菌株PRh5应为链霉菌属的一个新种，并将此菌命名为：链霉菌Strepomyces sp. PRh5，该菌于2013年10月23日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉市武汉大学，其保藏编号为CCTCC M 2013487。

形态学特征：在高氏合成一号培养基上 32°C 插片培养7~14 d，取插片分别在光学显微镜下观察，基内菌丝多分支，无横隔、无断裂现象；气生菌丝发育良好，后期孢子链自行断裂，分散，扫描电镜下观察，PRh5孢子链表面褶皱，孢子链呈螺旋生长，螺旋一般为两圈半，孢子呈圆球形（图3）。

本发明发现链霉菌Strepomyces sp. PRh5 能够产生抗生素尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)。因此本发明的第二个目的是提供了一种制备抗生素尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)的方法，所述的尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)的发酵培养物中制备分离得到的。

本发明优选通过以下方法从链霉菌Strepomyces sp. PRh5的发酵

培养物中制备分离得到抗生素尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)，具体方法如下：