[发明专利]一种链霉菌及利用其制备两种抗生素的方法有效
| 申请号： | 201310626669.7 | 申请日： | 2013-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN103642723A | 公开（公告）日： | 2014-03-19 |
| 发明（设计）人： | 朱笃;邓映明;张志斌;颜日明;汪涯;杨慧林 | 申请（专利权）人： | 江西师范大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12P17/18;C12P17/10;C12R1/465 |
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| 地址： | 330000 *** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 霉菌 利用 制备 抗生素 方法 | ||
1.一种链霉菌，其特征在于命名为链霉菌PRh5（Strepomyces sp. PRh5），其保藏号为：CCTCC NO：M 2013487，在国家知识产权局指定的保藏单位保藏，保藏日期为2013年10月23日，保藏单位名称：中国典型培养物保藏中心。
2. 根据权利要求1所述的链霉菌Strepomyces sp. PRh5，其16S rDNA序列为SEQ ID NO：1。
3. 一种利用权利要求1所述的链霉菌Strepomyces sp. PRh5制备尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)的方法，其特征在于，所述的尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)是从权利要求1所述的链霉菌Strepomyces sp. PRh5的发酵培养物中制备分离得到的。
4. 根据权利要求3所述的利用链霉菌Strepomyces sp. PRh5制备尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)的方法，其特征在于，包括以下步骤：
a) 制备链霉菌Strepomyces sp. PRh5的发酵培养物，将该发酵培养物的发酵液和菌丝体分离开，发酵液经石油醚、氯仿梯度萃取，石油醚层经减压浓缩后得到浸膏A；氯仿层减压浓缩后得到浸膏B；
b) 将浸膏A经硅胶柱层析，用石油醚/ 乙酸乙酯作为洗脱剂，从体积比70∶30 ～60∶40进行梯度洗脱，收集石油醚/ 乙酸乙酯体积比50∶50梯度洗脱下来的馏分，得尼日利亚菌素(nigericin)；
c) 将浸膏B经硅胶柱层析，用氯仿/甲醇作为洗脱剂，从体积比100：0～0:100进行梯度洗脱，收集氯仿/甲醇体积比90:1梯度洗脱下了的馏分A1，馏分A1 经LH-20凝胶柱层析，用体积比为1 ∶1 的氯仿- 甲醇作为流动相洗脱，得化合物诺卡胺素 (Nocardamine)。
5. 根据权利要求4所述的利用链霉菌Strepomyces sp. PRh5制备尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)的方法，其特征在于，所述的
a) 步骤的制备链霉菌Strepomyces sp. PRh5的发酵培养物是通过以下方法制备：将活化的链霉菌Strepomyces sp. PRh5接入种子培养基中，28℃，150rpm，培养96h制得种子液，将种子液以7.5％的接种量接入到发酵培养基中, 28℃, 150rpm, 振荡培养240h，而制得发酵培养物，所述的种子培养基为每升培养基中含有：玉米粉15g，玉米淀粉5g，黄豆饼粉5g，酵母膏0.5g，KH2PO4 0.5g，KNO3 0.5g,，NaCl 0.5g，CaCO3 3g，补水至1L，pH8.0，发酵培养基的配方为每升培养基中含有：玉米粉44g，玉米淀粉17g，黄豆饼粉5g，酵母膏0.5g，K2HPO4 0.25g，KNO3 0.35g,，NaCl 0.5g，CaCO3 6g，补水至1L， pH8.0。
6. 权利要求1 所述的链霉菌Strepomyces sp. PRh5在制备尼日利亚菌素(nigericin)与诺卡胺素 (Nocardamine)中的应用。
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