[发明专利]制备高纯度伊诺肝素方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物药用原料的制备方法，属于生物工程领域，具体是一种生产依诺肝素钠的工艺。 

技术背景

依诺肝素钠(enoxaparin sodium，1)属于低分子肝素，本品抗血栓作用强、出血危险性小，是目前抗凝血、抗血栓形成的主要治疗药物之一，2006年的全球销售额达24、3ML欧元。曾经法国Aventis公司研发，并于1993年申请过制备工艺的专利。但该专利未涉及生产过程中酯化率、成环率及产物纯化等关键工艺。采用该专利方法生产的样品无法达到欧洲药典4、0版规定的标准。本工艺究通过控制上述反应条件，得到适于工业生产的工艺，所得依诺肝素钠成品均符合欧洲药典。 

发明内容

本发明在于解决上述问题，提供一种纯度高，安全性好的依诺肝素钠的制备方法。 

本发明的技术方案为： 

1、将粗品一诺肝素钠溶于质量百分浓度1.2-1.8％氯化钠溶液中，得到伊诺肝素的溶液，向滤液中加碱液直至产生沉淀，静置，过滤去除不溶物，得滤液； 

2、将步骤1中滤液用2-6mol/L盐酸调批pH到7.0-7.5，上疏水层析柱，收集洗脱液； 

3、将步骤2中收集的洗脱液用纯化水稀释，将稀释的洗脱液上样到阴离子 交换柱，上样结束后，分别用0.005mol/L-0.02mol/L的和0.2mol/L-0.5mol/L的氯化钠溶液洗涤柱体直至钡盐检测无白色浑浊，最后以1mol/L-3mol/L的氯化钠溶液洗涤，收集洗脱液； 

4、将步骤3中的洗脱液用纳滤膜孔径≤1000的纳滤脱盐浓缩，直至浓缩液中肝素钠的浓度为10wt％-25wt％； 

5、将步骤4中得到的浓缩液沉淀，干燥即得到依诺肝素钠成品。 

具体实施方式

实施例1 

(1)将50g一诺肝素钠溶于质量百分浓度1.6％氯化钠溶液中，得到伊诺肝素的溶液，向滤液中加碱液直至产生沉淀，静置，过滤去除不溶物，得滤液； 

(2)将滤液用2-6mol/L盐酸调批pH到7.3，上疏水层析柱，收集洗脱液； 

(3)将收集的洗脱液用纯化水稀释，将稀释的洗脱液上样到阴离子交换柱，上样结束后，分别用0.01mol/L的和0.3mol/L的氯化钠溶液洗涤柱体直至钡盐检测无白色浑浊，最后以2mol/L的氯化钠溶液洗涤，收集洗脱液； 

(4)洗脱液用纳滤膜孔径≤1000的纳滤脱盐浓缩，直至浓缩液中肝素钠的浓度为10wt％-25wt％； 

(5)将得到的浓缩液沉淀，干燥即得到依诺肝素钠成品。最终得到的一诺肝素钠各项指标符合《欧洲药典7.0》。