[发明专利]液相色谱串联质谱法测定香精香料中芝麻酚的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学检测技术领域，涉及芝麻酚的测定方法，具体地说是一种通过液相色谱-串联质谱法快速测定香精香料中芝麻酚的方法。

背景技术

当今食品安全问题日益受到社会关注。烟用添加剂，尤其是香精香料的添加剂安全性问题也越来越受到关注。

芝麻酚，又名3,4-亚甲二氧基苯酚，具有非常强的抗氧化能力，是常用于食品、医药和香精香料领域的抗氧化剂。然而随着科技的进步，芝麻酚的致癌活性逐步被认知，毒理学试验发现，芝麻酚对动物腺胃有毒性，会引起腺胃刺瘤或癌变。2006年日本已将芝麻酚列为食品禁用添加剂。

目前，对芝麻酚的检测方法主要有显色法、紫外分光光度法、薄层色谱法(TLC)、气质联用法(GC-MS)及高效液相色谱法(HPLC)等。但这些方法均存在前处理步骤繁琐，检测时间较长等问题。例如，用气质联用法(GC-MS)存在检测时间较长的问题，检测一个样品的时间要40分钟以上，用高效液相色谱法(HPLC)灵敏度较差，检出限（LOD）≥80ng/mL，且需要的样品量较大（≥1g）。

近年来，随着液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）技术的发展，LC-MS/MS技术在化合物分析中得到广泛的应用。液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）分析技术无论在灵敏度上还是选择性上都具有明显的优势，且分析时间较短。为了在工业生产中，对大量香精香料样品的安全性指标进行有效的监控，急需一种能够快速、简单、灵敏、高效的液相色谱质谱方法检测香精香料中的芝麻酚。

发明内容

本发明的目的在于提供一种烟用香精香料中芝麻酚含量的测定方法，以实现对烟用香精香料中芝麻酚含量的快速、准确测定。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种香精香料中芝麻酚的检测方法，该方法采用液相色谱串联质谱法测定，采用外标法定量。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中芝麻酚的检测方法包括以下步骤：

（1）标准溶液的配制；称取芝麻酚标准品，用甲醇配制成具有浓度梯度的芝麻酚标准工作溶液；

（2）样品溶液的制备：使用甲醇萃取样品，然后过滤后制备样品溶液；

（3）液相色谱-串联质谱分析：利用液相色谱-串联质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析；

（4）烟用香精香料中芝麻酚含量的计算。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中芝麻酚的检测方法，其中所述的香精香料为烟用香精香料，优选地，所述的香精香料样品使用甲醇萃取样品中的芝麻酚；优选地，萃取用的甲醇为浓度为8～12％（v/v）甲醇水溶液，更优选地，萃取用的甲醇为浓度为10％（v/v）甲醇水溶液。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中芝麻酚的检测方法，其中萃取的方式为超声萃取。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中芝麻酚的检测方法，其中所述的香精香料样品的制备过程如下：称取适量待测香精香料样品，加入适量甲醇水溶液,室温下超声萃取,过滤后，得到样品溶液。优选的过滤方式采用微孔滤膜过滤，例如0.22μm有机滤膜或0.45μm有机滤膜。

在一个具体的实施方案中，所述香精香料样品的制备方法具体为：称取0.1g左右试样,置于25mL锥形瓶中;加入10%甲醇水溶液10mL,室温下超声30min,用0.22μm有机滤膜过滤后直接进样。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中芝麻酚的检测方法，其中色谱分析条件为以下（i）至（v）中的一项或多项：

（i）采用C18色谱柱，

优选地，所述的色谱柱的规格为50mm×2.1mm i.d.,2.6μm粒径。

（ii）色谱柱温度为28～32℃，优选为30℃，

（iii）进样量为8～12μL，优选为10μL，

（iv）流动相：乙腈-乙酸铵-乙酸-水溶液，

优选的流动相：A为乙腈，B为5mmoL/L乙酸铵溶液(含0.1%乙酸)，采用等度洗脱程序，体积比50：50，

（v）流速为0.1～0.3ml/min，优选为0.2ml/min，

（vi）洗脱时间约6min。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中芝麻酚的检测方法，其中质谱分析条件为以下（i）至（iii）中的一项或多项：

（i）用电喷雾离子阱串联质谱测定芝麻酚，

（ii）离子源：电喷雾电离源（ESI）；