[发明专利]一种生姜再生植株的诱导方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种生姜再生植株的诱导方法。

背景技术

生姜（Zingiber officinale Rosc.）为姜科姜属多年生草本植物，是香料家族和药用植物的主要成员，含蛋白质、粗脂肪、碳水化合物及各种维生素和矿物质，其经济价值较高，在食品工业和医药上具有较好的应用前景，是我国出口创汇的中药蔬菜之一。但生姜以老熟地下根状茎无性繁殖为主，其繁殖系数低，因而栽培成本高。应用组织培养技术可对优良生姜品种进行快速繁殖以满足生产需要，目前，对生姜的组织培养技术的研究比较成熟，但是，多以生长点、茎尖、叶鞘切段、根状茎作为外植体进行离体培养研究，这些研究结果为生姜的快繁提供了一定的技术基础，因为这些外植体的选用极大的耗费了生姜的原有资源，所以离生产需要还有一定距离，

本实验以生姜芽尖作外植体进行培养,以期为生姜优良品种的组培快繁提供更进一步的技术参考。

发明内容

针对现有技术存在的缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种生姜再生植株的诱导方法，以生姜的芽尖作为外植体进行组织培养，为生姜优良品种的组织培养快繁体系提供技术参考。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：一种生姜再生植株的诱导方法，包括如下步骤：

（1）种姜催芽：挑选块大、肉厚、无腐烂、无病害的健壮姜块作为种姜，将种姜用自来水冲洗干净后置于体积浓度为1-10%的次氯酸钠溶液中消毒3-8min，用无菌蒸馏水冲洗3-5次后埋于消毒过的沙土中，沙土的湿度保持40-60%，在25±2℃下培养2-3周至芽长为1-2cm；

（2）姜芽消毒处理：将步骤1中长度为1-2cm的姜芽从种姜上掰下，剥去表层叶片，在无菌操作台中进行处理，先用无菌水清洗3次，然后放入体积浓度为75%的乙醇中消毒30s，再用质量浓度为5-10%的聚维酮碘消毒5-10min，最后放入体积浓度为1-5%的次氯酸钠溶液中消毒1-5min，无菌水冲洗4次后用无菌滤纸吸干姜芽表面的水分；

（3）芽尖接种：用无菌解剖针一层一层的剥离姜芽的叶片，只剩最后2-4片叶片的姜芽为接种所用的芽尖，将芽尖接种于诱导培养基中诱导丛生芽的形成，培养条件为温度22±2℃、光强1500-2000Lx，光照时间8h；

（4）继代增殖：当步骤3中生成的丛生芽长度为-3cm时，在无菌操作台中用无菌蒸馏水冲洗丛生芽，将丛生芽基部的培养基冲洗干净；然后将丛生芽分成单芽，将单芽转入增殖培养基中进行继代增殖培养，每三个星期继代一次，继代培养条件为温度22±2℃、光强1500-2000Lx，光照时间12h；

（5）生根培养：当步骤4中的单芽长度达到3-4cm时即可进行生根壮苗培养，将长度为3-4cm的单芽从培养基中取出，无菌蒸馏水冲洗干净单芽基部的培养基，接种于生根培养基中培养2-3周至百色的根形成，培养条件为温度25±2℃、光强1500-2000Lx，光照时间12h；

（6）炼苗移栽：步骤5中的单芽形成根后，当根的长度为1-2cm时即可进行炼苗，炼苗时，先将生好根的瓶苗搬到室外，在自然条件下炼苗5-7d，再将瓶盖打开炼苗2-3d，然后将苗取出洗干净培养基，移栽到经消毒的浇透水的蛭石中炼苗10-15d，最后移栽到大田中即可。

进一步的，所述的诱导培养基的配方为：1L MS培养基中添加6-BA1-5mg、NAA0.5-2mg、蔗糖30g、琼脂7g，pH值为5.5-5.8。

进一步的，所述的继代培养基的配方为：1L MS培养基中添加6-BA0.5-2.5mg、NAA 0.1-0.5mg、蔗糖30g、琼脂7g，pH值为5.5-5.8。

进一步的，所述的生根培养基的配方为1L MS培养基中添加NAA 0.05-0.2 mg、蔗糖25g、琼脂5g，pH值为5.5-5.8。

本发明的有益效果是：由于生姜长期埋于地下，易感染多种病菌，本发明的消毒方法可以最大程度的消毒灭菌却不损害姜芽的生长；6-BA和NAA可促进生姜幼芽发生，且具有相互增益效应，对生姜快繁有明显的影响，芽的再生率高达89%；低浓度的NAA具有促进姜芽申根的功效，芽的生根率可以达到67%。

具体实施方式

以下通过实施例进一步阐述本发明的有益效果：

实施例1：

一种生姜再生植株的诱导方法，包括如下步骤：