[发明专利]抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体及其制备方法与应用

权利要求书

1.抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体，其特征在于：可与Sjp40特异性结合，其抗原特异性结合活性检测中可识别Sjp40，且OD值随着抗体稀释度降低而减小,具有抗原浓度依赖性，所述抗体是由下述方法得到的：

（1）收集用纯化的SjP40抗原初次免疫的健康SPF级产蛋鸡的鸡蛋，采用水稀释硫酸铵沉淀法从鸡蛋中初步提取IgY；

（2）再依次经透析袋、DEAE-FF阴离子交换柱进一步纯化IgY；

（3）用聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western blotting及ELISA对IgY进行分析鉴定。

2.权利要求1所述的抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体的制备方法，其特征在于：具体步骤为：

（1）收集用纯化的SjP40抗原初次免疫的健康SPF级产蛋鸡的鸡蛋，采用水稀释硫酸铵沉淀法从鸡蛋中初步提取IgY；

（2）再依次经透析袋、DEAE-FF阴离子交换柱进一步纯化IgY；

（3）用聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western blotting及ELISA对IgY进行分析鉴定。

3.根据权利要求2所述的抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体的制备方法，其特征在于：具体步骤为：

（1）收集用纯化的SjP40抗原初次免疫的健康SPF级产蛋鸡的鸡蛋，取卵黄与蒸馏水按1:8稀释，盐酸调PH至4.2-4.4，搅匀4℃静置过夜后，4℃，12000r/min离心30min收集上清得水溶性组分。向WSF中滴加等体积40%硫酸铵盐析，再同上法4℃静置过夜并离心；

（2）用适量1×PBS重悬沉淀，置常规处理过的透析袋中，4℃下PBS透析48h，每隔4h换次透析液，最后聚乙二醇20000浓缩至2ml，-20℃保存备用；采用HiTrap DEAE-FF阴离子交换预装柱进一步纯化，上样平衡缓冲液为0.01mol/L、PH=7.4的磷酸盐缓冲液，洗脱缓冲液为含终浓度为1mol/L NaCl的PH=7.4的磷酸盐缓冲液，抗Sjp40IgY用上样平衡缓冲液稀释经0.22um微孔滤膜脱气缓慢进样，线性梯度洗脱，线速度1ml/min，最后收集的洗脱峰-20℃保存；

（3）用聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western blotting及ELISA对IgY进行分析鉴定。

4.权利要求1所述的抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体在识别Sjp40方面的应用。

5.根据权利要求4所述的抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体在制备胶体金诊断试纸条或诊断试剂盒中的应用。