[发明专利]一种Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米递药系统及其制备方法

权利要求书

1.一种Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统，其特征在于该纳米给药系统是由以两亲性聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)嵌段共聚物为载体材料制备的聚合物纳米粒、包载于该聚合物纳米粒中的紫杉醇及聚合物纳米粒表面修饰配体Pep-1多肽构成。 

2.根据权利要求1所述的Pep-1肽修饰的胶质瘤靶向纳米递药系统，其特征是：所述聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)嵌段共聚物是由马来酰亚胺聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)(Male-PEG-PLGA)和单甲氧基聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)(MePEG-PLGA)组成，上述单甲氧基聚乙二醇重均分子量为2000～7000，马来酰亚胺聚乙二醇重均分子量为3000～5000，聚(乳酸-羟基乙酸)重均分子量为10000～40000。 

3.根据权利要求1所述的多肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统，其特征是：所述多肽Pep-1与马来酰亚胺聚乙二醇的摩尔比为1～10:1。 

4.根据权利要求1所述的Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统，其特征是：所述多肽Pep-1的氨基酸序列为CGEMGWVRC。 

5.根据权利要求1所述的Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统的制备方法，其特征是：先将Pep-1多肽与马来酰亚胺聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)聚合物通过共价结合连接，再将反应后的材料与单甲氧基聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)聚合物按照一定比例通过乳化/溶剂蒸发法或者溶剂扩散法制备成聚合物纳米粒，并将紫杉醇包载于所述聚合物纳米粒中。 

6.根据权利要求5所述的Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统的制备方法，其特征在于所述Pep-1多肽与马来酰亚胺聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)共价结合方法包括以下步骤：将Male-PEG-PLGA溶于适量二甲基甲酰胺中，滴加到适量磷酸盐缓冲液中(pH:7.0～7.4)，再将Pep-1多肽溶解于该磷酸盐缓冲液中(pH:7.0～7.4)，搅拌，氮气保护，反应8～16小时，反应后的溶液通过透析法除去未反应的多肽，即得Pep(Acm)-PEG-PLGA。在透析后的溶液中加入适量醋酸，滴加适量碘的甲醇溶液，氮气保护，反应0.5～2小时；将反应后的溶液透析，冻干，即得Pep-PEG-PLGA。 

7.根据权利要求5所述的Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统的制备方法，其特征在于所述乳化/溶剂蒸发法包括以下步骤：将一定量Pep-PEG-PLGA、MePEG-PLGA和PTX溶于适量乙酸乙酯中，加入适量0.2%～1.0%泊洛沙姆188水溶液，间断超声形成水包油(O/W)乳剂，分散到适量0.2%～1.0%泊洛沙姆188水溶液，搅拌，40℃旋转蒸发除去乙酸乙酯，过膜，即得靶向纳米粒。 

8.根据权利要求5所述的Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统的制备方法，其特征在于所述溶剂扩散法包括以下步骤：将一定量Pep-PEG-PLGA、MePEG-PLGA和PTX溶于适量丙酮中，滴加到适量0.2%～1.0%泊洛沙姆188水溶液中，搅拌，50℃旋转蒸发除去丙酮，过膜，即得靶向纳米粒。 

9.根据权利要求5所述的Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统的制备方法，其特征在于在合成配体肽Pep-1时，对其一端的半胱氨酸进行Acm保护(C(Acm)GEMGWVRC)，即合成Pep-1(Acm)肽；利用活泼的Male-PEG-PLGA与Pep-1(Acm)肽片段上未保护半胱氨酸残基上的巯基反应，形成化合物Pep(Acm)-PEG-PLGA，再经过脱Acm保护基团后得到Pep-PEG-PLGA；合成步骤为： 

(1)将Male-PEG-PLGA溶于适量二甲基甲酰胺(DMF)中，滴加到适量磷酸盐缓冲液中(pH:7.0～7.4)； 

(2)将Pep-1多肽加入适量磷酸盐缓冲液中(pH:7.0～7.4)，滴加到步骤(1)中的溶液中，搅拌，氮气保护，反应8～16小时，反应后的溶液装入透析袋中透析除去未反应的多肽，即得Pep(Acm)-PEG-PLGA； 

(3)在透析后的溶液中加入适量醋酸，滴加适量碘的甲醇溶液，氮气保护，反应0.5～1小时，将反应后的溶液透析，冻干，即得Pep-PEG-PLGA。

10.根据权利要求5－9之一所述的Pep-1肽修饰的脑胶质瘤靶向纳米给药系统的制备方法，其特征在于紫杉醇与聚乙二醇-聚(乳酸-羟基乙酸)聚合物纳米粒的质量比为1:10～20。