[发明专利]高山被孢霉突变株及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种高山被孢霉突变株及其应用。

背景技术

花生四烯酸(Arachidonic acid，简称ARA)是一种重要的多不饱和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acids,PUFAs），它作为一种极为重要的结构脂类广泛存在于哺乳动物的器官、肌肉和血液组织中，除此，它还是许多二十碳酸衍生物如前列腺素E2（PGE2）、前列环素（PGI2）、血栓烷素A2（TXA2）、白三烯B4（LTB4）和C4（LTC4）的直接前体，这些生物活性物质对脂蛋白的代谢、血液流变学、血管弹性、白细胞功能和血小板激活等具有重要的调节作用。

花生四烯酸油脂目前已经进入工业化生产阶段，但是，目前研究多只关注于油脂中花生四烯酸的含量，却忽略了油脂中其他成分，特别是长链饱和脂肪酸的含量。而长链饱和脂肪酸的含量对油脂的品质影响非常大，如花生四烯酸油脂中长链饱和脂肪酸在体系中所占的比例对油脂的凝固点起着决定作用，特别是二十碳以上的长链饱和脂肪酸，例如花生酸(C20:0)，山嵛酸(C22:0)，木蜡酸(C24:0)等，并且饱和脂肪酸的凝固点一般是随烷基碳链长度(即碳原子数)的增加而增加。目前，市售高山被孢霉生产的花生四烯酸油脂产品中二十碳以上的长链饱和脂肪酸的含量在20wt%左右，其在12℃时即会析出饱和脂肪酸、出现体系浑浊的现象，这样就影响了花生四烯酸油脂的质量。

中国发明专利公开号为CN1362522A的专利申请公开了一种以高山被孢霉为出发菌株进行粒子束诱变得到的菌株生产花生四烯酸的方法。但是，其未提及长链饱和脂肪酸的含量的控制。中国发明专利公开号为CN101709297的专利申请公开了一种诱变筛选花生四烯酸产生菌高山被孢霉的方法。其同样也未提及长链饱和脂肪酸的含量的控制。

鉴于现有的高山被孢霉菌种所制得的花生四烯酸油脂中，长链饱和脂肪酸的含量都比较高，因此，提供一种新的能够生产长链饱和脂肪酸含量较低的高山被孢霉突变株实为必要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种新的高山被孢霉突变株及其应用。该高山被孢霉突变株能用于低含量长链饱和脂肪酸花生四烯酸油脂的生产。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为；

高山被孢霉突变株（高山被孢霉ZR36，Mortierella alpine ZR36）于2013年9月13日保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏地址是，中国，武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:M2013419。

上述高山被孢霉突变株在生产低含量长链饱和脂肪酸的花生四烯酸油脂中的应用。

按上述方案，所述的花生四烯酸油脂中二十碳以上的长链饱和脂肪酸含量低于15wt%。所述的二十碳以上的长链饱和脂肪酸包括花生酸、山嵛酸、木蜡酸。

按上述方案，所述的花生四烯酸油脂中木蜡酸(C24:0)的含量小于8wt%。

按上述方案，所述花生四烯酸油脂的凝固点为4℃-11℃。

本发明的有益效果：

本发明通过以高山被孢霉为出发菌种经诱变筛选得到的高山被孢霉突变株CCTCC NO:M2013419所生产的花生四烯酸油脂中，可大大降低长链饱和脂肪酸特别是二十碳以上长链饱和脂肪酸的总含量（二十碳以上饱和脂肪酸的总含量低于15wt%），进而可明显降低由其制备的花生四烯酸油脂的凝固点，使其在较低温度下也不会凝固结晶析出饱和脂肪酸，油脂品质较高。特别地，长链的饱和脂肪酸木蜡酸(C24:0)的含量较低（小于8wt%），由此可进一步有效地降低花生四烯酸油脂的凝固点，更好地保证花生四烯酸油脂的品质。

具体实施方式

为了能够更清楚地理解本发明的技术内容，特举以下实施例详细说明，有助于理解本专利。

实施例1.高山被孢霉突变株的选育方法

（1）取市售高山被孢霉为出发菌株。

（2）将菌种接种于马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基上在28℃恒温条件下培养8天至孢子成熟。

（3）通过纱布或滤纸过滤得到纯的孢子液，将孢子液注入到无菌培养皿上经过紫外灯照射,紫外灯照射距离为30厘米，照射时间为60秒，紫外灯的功率为30瓦。

（4）经过紫外诱变后的孢子液经无菌风风干，成为菌斑。将含菌斑的培养皿无菌移入高能粒子束注入机中，经过高能离子束注入诱变。