[发明专利]一种复合芽孢杆菌粉活菌含量的快速计数方法

权利要求书

1.一种复合芽孢杆菌粉活菌含量的快速计数方法 ，其特征在于 ，包括如下步骤 ：

1） 样品的制备 ：无菌操作随机称取复合芽孢杆菌粉  l g ，加入盛有 8mL 无菌营养肉汤的45mL 具塞离心管中 ，于漩涡振荡仪上振荡混匀制成 1 : 10 的稀释母液 ；

2） 样品的稀释 ：无菌操作用 lmL 玻璃移液管吸取 lmL   1  :  10 的稀释母液，加入盛有8mL 无菌营养肉汤的 45mL 具塞离心管中 ，混匀成 1  :  102 的稀释液，这样依次稀释 ，分别得到

1 : 10³、1 : 10⁴、1 : 10⁵、1 : 10⁶、1 : 10⁷、1 : 10⁸、1 : 10⁸、1 : 10¹⁰、1 : 10¹¹、1 : ¹⁰ 、

1  :  10¹³ 稀释度的稀释液 ；

3） 培养 ：将 1 : 10 的稀释母液以及 1 : 10²、1 : 10³、1 : 10⁴、1 : 10⁵、1 : 10⁶、1 : 10⁷、

1 : 10⁸、1 : 10⁸、1 : 10¹⁰、1 :  10¹¹、1  :  10¹² 、1  :  10¹³ 的稀释液置于转速为 200r/min 、温度为 35 —37 ℃的温控摇床中 ，培养 18 —24h ；以盛有 8mL 无菌营养肉汤的 45mL 具塞离心管 作为对照 ；

4） 测定 ：以盛有 8mL 无菌营养肉汤的 45mL 具塞离心管作为对照 ，用 lmL 玻璃移液管无 菌操作吸取 0. lmL 培养 18-24h 变浑浊的各稀释液采用 Schaef f er-Fu l ton 氏染色法进行芽孢染色 ，显微镜观察有无绿色的芽孢 ；显微镜观察有绿色芽孢 、且变浑浊的稀释液所对应的 稀释度的倒数即为复合芽孢杆菌粉的活菌含量  。