[发明专利]快速检测猪萨佩罗病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用无效
申请号: | 201310560789.1 | 申请日: | 2013-11-12 |
公开(公告)号: | CN103614493A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 兰道亮;陈亚冰;李键;吉文汇;孙焕;华修国 | 申请(专利权)人: | 西南民族大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12Q1/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 610041 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 快速 检测 猪萨佩罗 病毒 荧光 定量 pcr 试剂盒 应用 | ||
1.快速定量检测猪萨佩罗病毒的荧光定量PCR试剂盒,试剂盒包括:
a)RNA裂解液,b) PrimeScript? RT Enzyme Mix I,c)逆转录反应液,d)定量引物F及R, e) SYBR? Premix Ex Taq II,f) ROX Reference Dye,g)标准阳性模板,h)阴性对照品,i)无菌双蒸水
所述逆转录反应液含有5×PrimeScript? Buffer,Oligo dT Primer,Random 6 mers引物,
标准阳性模板是含有猪嵴病毒特异性目的片段的质粒,阴性对照样品由SPF猪粪便样品中提取RNA,经过逆转录获得的cDNA样品,SYBR? Premix Ex Taq II液含有TaKaRa Ex Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,SYBR? Green I。
2.根据权利要求1所述的萨佩罗病毒荧光定量PCR试剂盒,其特征在于:所述引物为
F:5’-CAGACAAATCAACAACTTTCCAA-3’
R:5’-ATCTAACCAAGACCTACGCAGC-3’。
3.根据权利要求1所述的定量检测试剂盒,其特征在于灵敏度达到70 copies/μL,完全可以满足萨佩罗病毒的快速检测及定量的要求。
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