[发明专利]真鲷虹彩病毒分子标准样品及其制备方法有效
| 申请号： | 201310557677.0 | 申请日： | 2013-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN103589806A | 公开（公告）日： | 2014-02-19 |
| 发明（设计）人： | 吴斌;肇慧君;林长军;胡强 | 申请（专利权）人： | 吴斌;肇慧君;林长军;胡强 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/70;C12N15/66;C12R1/93 |
| 代理公司： | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人： | 贾汉生;李馨 |
| 地址： | 116001 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 真鲷 虹彩 病毒 分子 标准 样品 及其 制备 方法 | ||
1.一种真鲷虹彩病毒的检测引物，其特征在于，碱基序列为SEQ ID NO：1～2。
2.一种真鲷虹彩病毒的检测试剂盒，其特征在于，包括检测引物：SEQ IDNO：1～2。
3.一种真鲷虹彩病毒的标准样品，其特征在于，制备步骤包括：
（1）采集感染真鲷虹彩病毒的鱼组织，研磨、得鱼组织匀浆液；
（2）将鱼组织匀浆液加入到长成单层的GF细胞中，吸附1小时后，加入培养基继续培养、待细胞感染病毒脱离时，回收细胞经反复冻融、离心得细胞上清液；
（3）步骤（2）得到的细胞上清液中提取得到病毒DNA；
（4）步骤（3）的病毒DNA作为PCR反应模板，进行PCR扩增反应，其中PCR反应的正反引物分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2；
（5）将步骤（4）的PCR扩增产物经纯化后连接至PGEM-T载体中，连接产物转化至感受态细胞后，LB平板培养，筛选得到阳性克隆；
（6）阳性克隆中提取得到质粒，即为真鲷虹彩病毒的标准样品。
4.根据权利要求3所述的真鲷虹彩病毒的标准样品，其特征在于，在步骤（2）中所述培养基为L-15培养基；在步骤（5）中筛选阳性克隆的方法为PCR方法，其中PCR反应的正反引物分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。
5.根据权利要求3所述的真鲷虹彩病毒的标准样品，其特征在于，在步骤（1）中所述鱼组织包括脑、肝、肾和脾。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于吴斌;肇慧君;林长军;胡强，未经吴斌;肇慧君;林长军;胡强许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
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