[发明专利]一种消渴清颗粒的含量检测方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种药物的有效成分测定方法，特别涉及一种消渴清颗粒中药物有效成分含量检测方法

背景技术：

消渴清颗粒为一种已经上市的治疗糖尿病的中成药，其配方组成如下：知母、苍术、黄连、蒲黄、地锦草、以及适量辅料，其制备方法包括以下步骤：

(a)取知母、苍术、黄连、蒲黄、地锦草、备用；

(b)苍术用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，将苍术挥发油用β-环糊精包合，苍术油与β-环糊精按1∶6投料，在50℃干燥，制得β-环糊精包合物备用，提取液滤过，得滤液1；

(c)知母、黄连、蒲黄、地锦草以及苍术水提后的残渣加8倍量水煎煮两次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1小时，合并两次煎液，过滤得滤液2，合并滤液1与2，浓缩滤液成比重为1.10～1.15的清膏，干燥得干浸膏；

(d)：上述干浸膏及挥发油包合物，充分混合，即得药物活性物质，进一步和药物可接受的辅料混合制成颗粒等制剂形式。

消渴清颗粒中，各味药起着不同的功效，其中，苍术辛苦温，入脾胃二经，气味芳香，善行而不守，既可燥湿健脾，又能行气开郁，故朱丹溪谓其：“苍术为足阳明经药，气味辛烈，强胃健脾发谷之气”，“能解诸郁”。知母甘寒，入肺、胃、肾经，具有滋阴降火，清热润燥之功，《本草纲目》认为，“知母下则润胃燥而滋阴，上则清肺金而泻火。”，《本经》谓“主消渴热中，除邪气。”，二药皆为君，二药相互配伍，共行滋肾阴，健脾运，化郁之功；黄连气味苦寒，具有清热燥湿，泻火解毒，以之为臣，辅知母以护肾阴，助苍术以化湿浊；生蒲黄性凉味甘辛，入心、肝二经，凉血化瘀，血行津布而燥热可解，瘀去气行，而阴津自生，且能改善糖尿病合并心脑血管病变，以之为佐；地锦草乃民间天然降糖妙品，味微苦辛而性平，清热解毒，活血通脉不仅善降血糖，且对糖尿病并发痈疽疮疖也有良效，以之为使，诸药合用，则共奏滋阴清火，健脾活血之功，诸症可缓解而愈之。以上诸药，按照中医方剂学的基础理论，巧妙配伍，严密组合，共奏滋阴降火、清热化湿、活血化瘀之功，从而达到向愈的目的。

消渴清颗粒（XiaoKeQing granules，XKQ）是由知母、苍术、黄连、蒲黄及地锦草5味药组成。中国专利：200310107286，200410048002.4公开了有关的配方和制备。目前，消渴清颗粒质量标准含量测定项下仅对知母水解产物中的菝葜皂苷元进行了含量测定，无法全面表征中药制剂的整体性和复杂性，由于消渴清颗粒由5种中药材制备而成，其有效成分复杂多样，有必要寻找一种可以检测其中多种成分的方法，以有效的控制生产过程中产品的含量和质量，为此发明人进行了多种检测方法的实验，最终获得一种适合消渴清颗粒的方法，并对其中含量较高的5个成分新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱进行了含量测定。

发明内容：

本发明采用UPLC-PDA-ELSD色谱法对消渴清制剂中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱进行了含量测定，为消渴清的质量提供了安全、有效、准确的控制。

本发明提供一种消渴清制剂的检测方法，特别包括消渴清颗粒的检测方法。

所述方法包括以下步骤：

供试品溶液制备：

取消渴清制剂，加入提取溶剂甲醇或乙醇适量，超声溶解，再加入溶剂调整溶液浓度，微孔滤膜滤过，取滤液，既得。

对照品储备液的制备：

取新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱对照品，加甲醇溶解，得到对照品储备液。

含量测定：

将上述供试品溶液和对照品储备液分别注入UPLC-PDA-ELSD色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，用峰面积法计算供试品溶液中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱的含量，并得到消渴清制剂中这些成分的含量。

其中，所述UPLC-PDA-ELSD色谱仪，其色谱条件如下：

色谱柱：选自：UPLC C18或T3柱；

流动相：选自：溶剂A（醋酸盐缓冲溶液（含0.3-0.5%乙酸及0.05-0.1%三乙胺））–溶剂B（乙腈）；溶剂A（0.1%甲酸水溶液）–溶剂B（乙腈）；溶剂A（0.1%醋酸水溶液）–溶剂B（乙腈）中的一种。

本发明采用梯度洗脱进行洗脱，所述梯度洗脱：选自以下四个不同的洗脱方案中的一种：