[发明专利]一种消渴清颗粒的含量检测方法

权利要求书

1.一种消渴清制剂的检测方法，包括以下步骤：

供试品溶液制备：

取消渴清制剂，加入提取溶剂甲醇或乙醇适量，超声溶解，再加入溶剂调整溶液浓度，微孔滤膜滤过，取滤液，既得，

对照品储备液的制备：

取新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱对照品，加甲醇溶解，得到对照品储备液，

含量测定：

将上述供试品溶液和对照品储备液分别注入UPLC-PDA-ELSD色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，用峰面积法计算供试品溶液中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱的含量，并得到消渴清制剂中这些成分的含量，

其中，所述UPLC-PDA-ELSD色谱仪，其色谱条件如下：

色谱柱：UPLC C18或T3柱；

流动相：选自：溶剂A醋酸盐缓冲溶液其中含0.3-0.5%乙酸及0.05-0.1%三乙胺–溶剂B乙腈；溶剂A0.1%甲酸水溶液–溶剂B乙腈；溶剂A0.1%醋酸水溶液–溶剂B乙腈，中的一种；

采用梯度洗脱进行洗脱，所述梯度洗脱：选自以下四个不同的洗脱方案中的一种：

①0～4min，5%–10%B，4～10min，10%–15%B，10～13min，15%–22%B，13～15min，22%–30%B，15～18min，30%B，18～20min，30%–80%B，20～23min，80%–5%B；

②0～4min，5%B，4～5min，5%–10%B，5～8min，10%B，8～10min，10-15%B，10～11min，15-12%B，11～13min，12%–22%B，13～15min，22%–30%B，15～18min，30%B，18～20min，30%–80%B，20～23min，80%–5%B；

③0～4min，5%B，4～5min，5%–10%B，5～8min，10%B，8～10min，10-15%B，10～11min，15-12%B，11～13min，12%–20%B，13～14min，20%–25%B，14～18min，25–30%B，20～23min，80%–5%B；

④0～4min，5%B，4～5min，5%–10%B，5～8min，10%B，8～10min，10-20%B，10～13min，20%B，13～14min，20%–25%B，14～18min，25–30%B，20～22min，80%–5%B；

柱温：25-35℃

流速：0.15-0.25ml/min

ELSD空气流速：2.0-3.0L·min^-1；

漂移管温度：100-110℃；

进样量为2-4μL，

紫外检测波长：240-340nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液制备方法如下：

取消渴清制剂1-7g,用50-80%乙醇或25-80%甲醇超声提取，超声时间为20-40min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液制备方法如下：

提取溶剂为75%的乙醇，或70-80%的甲醇。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液制备方法如下：

取消渴清制剂6g，精密称定，置25ml量瓶中，加75%甲醇适量，功率500w超声30min，放置至室温，加75%甲醇定容至刻度，0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，既得。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品储备液的制备方法如下：

取新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱对照品，加70-80%的甲醇，溶解，得到对照品储备液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品储备液的制备方法如下：

取新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱对照品，加75%的甲醇，溶解，得到对照品储备液。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品储备液的制备方法如下：

取新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱对照品适量，精密称定，加75%甲醇溶解，得到质量浓度分别为0.244、0.784、0.772、0.070和0.224μg·μL^-1的对照品储备液。