[发明专利]一种提高微生物发酵生产2,3‑丁二醇的方法

权利要求书

1.一种提高微生物发酵生产2,3-丁二醇的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）种子液培养：以MRS培养基进行乳酸菌的培养，获得乳酸菌种子液，所述乳酸菌为干酪乳杆菌；以LB培养基进行克雷伯氏菌的培养，获得克雷伯氏菌种子液；（2）发酵培养：在发酵培养基中接入两种菌混合的发酵种子液，乳酸菌种子液与克雷伯氏菌种子液按照1:1～1:3的比例配成发酵种子液，培养基以葡萄糖为底物，在发酵初始阶段以厌氧或微氧发酵为主，当光密度OD₆₅₀大于5时增加通气量，进行好氧发酵。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述克雷伯氏菌为肺炎克雷伯氏菌。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的种子液的培养过程如下：将菌种保藏液与种子培养基按体积1:100～1:500的比例混合于培养反应器内，培养温度为30℃～40℃，搅拌速度为100rpm～400rpm，pH控制在4～7之间，种子液培养过程中保持微氧或厌氧条件。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的微氧发酵时无空气通入，依靠发酵液中溶解氧维持微氧状态；厌氧发酵时通入流速为0.1vvm～0.5vvm的氮气；好氧发酵时通入流速为0.5vvm～1vvm的空气。

5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：所述的发酵过程如下：发酵种子液体积和培养基体积按1:9～1:20比例在生物反应器内混合，培养温度为30℃～40℃，搅拌速度为200rpm～500rpm，pH控制在5～7之间。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的发酵初始葡萄糖底物浓度控制在50g/L～100g/L；发酵过程中，通过流加形式补充葡萄糖，使发酵体系中葡萄糖浓度控制在20g/L～40g/L。