[发明专利]一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物培养方法，尤其涉及一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法。

背景技术

鸟巢蕨是一种附生的蕨类植物，原生于亚洲东南部、澳大利亚东部、印度尼西亚、印度和非洲东部，又称巢蕨、山苏花、王冠蕨，为铁角蕨科，属多年生阴生草本观叶植物。近年来鸟巢蕨在观叶植物的应用中深受人们的喜爱。除了自然盆栽作为鲜切叶用于插花中供人们观赏外,鸟巢蕨还可以人工加工形成各种各样的形态,根据需要配置在不同位置形成不同的景观效应。这表明人们对鸟巢蕨的观赏要求越来越高。而波叶鸟巢维多利亚作为鸟巢蕨家族中的一员，其叶边缘优美的波浪形状，更是深受人们的喜爱。

在鸟巢蕨培植方面，以前大多是采用分株进行繁殖的方法。一棵鸟巢蕨一年只能繁殖出3～4棵，因其繁殖系数低，远不能满足市场的需要。因此，目前鸟巢蕨的繁殖方法多采用孢子播种法以及组织培养法。而目前鸟巢蕨的组织培养法也是利用孢子为原材料进行快繁，具体工艺是：把经过消毒灭菌的孢子囊从孢子叶上切下,破碎取出孢子后接种到培养基上,孢子萌发较快,萌发率高。萌发后的原叶体接种到不添加激素的MS培养基上能得到较大的增殖系数。 无论是孢子播种法还是利用孢子为原材料进行的组织培养法，都能快速的得到大量鸟巢蕨苗。但是对于波叶鸟巢蕨，孢子繁殖和利用孢子为原材料进行的快繁苗都有30%左右无法继承波叶鸟巢叶片本身的漂亮的波浪纹，剩下的70%波浪纹也不是很统一，有大波浪，小波浪，因此种植过程中需要进行筛选才能得到整齐统一的波叶鸟巢。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种繁殖速度快、成本低且能保持波叶鸟巢蕨叶片整齐统一波浪形状的组培方法。

本发明所采用的技术方案是，该方法包括以下步骤：

（1）诱导与分化：取波叶鸟巢蕨根状茎为外植体并进行无菌处理，取经过无菌处理的根状茎切成若干块状并放入MS培养基中进行培养，培养温度为24～26℃，光照1800～2000lux，光照时间为每天12h，培养16～18周时间，可见切口处分化出小颗粒状的原球茎；

（2）无菌苗的增殖培养：取上述原球茎置于MS培养基中，培养3～4周，培养温度为24～26℃，光照2200～2600lux，光照时间为每天12h，每个原球茎分化出3～4个新的原球茎；

（3）无菌苗的移栽驯化：将原球茎置于MS培养基                                                中培养3～4周，每颗原球茎长出1～3棵小苗，再将长出的每棵小苗置于MS培养基中培养3～4周，即进行移栽驯化，洗净无菌苗根部的培养液并移栽进泥炭土和珍珠岩组成的基质内，保持温度为18～28℃，光照5000～7000Lux。

进一步地，在所述步骤（1）中，对波叶鸟巢蕨根状茎进行无菌处理的步骤为：剥干净根状茎外面的叶鞘和毛鳞，用75％的酒精处理10秒，再在0.1％的升汞溶液中浸泡8～10分钟后取出，最后用无菌水冲洗4～5次。

进一步地，在所述步骤（1）中的MS培养基中加入有BA和IAA，MS培养基中的BA的浓度为 0.5～1.5mg/L，IAA的浓度为 1～3mg/L，所述鸟巢蕨根状茎切成的块状长度为0.3cm。

进一步地，在所述步骤（2）中，在所述MS培养基中加入有BA、KT和糖，MS培养基中的BA浓度为 0.2～1.0mg/L、KT的浓度为 0.1～0.5mg/L，糖的浓度为3％。

进一步地，在所述步骤（3）中，在所述MS培养基中加入有活性炭和糖，MS培养基中的活性炭的浓度为2g/L，糖的浓度为3％。

进一步地，在所述步骤（3）中，在所述MS培养基中加入有IBA和糖，MS培养基中的IBA的浓度为1mg/L，糖的浓度为3％。

进一步地，经过所述MS培养基培养后，每颗原球茎长出的小苗高0.5厘米，在经过所述MS培养基培养后，每颗小苗长成1～1.5厘米高，并有二至三条黑色小须根。

更进一步地，该方法还包括以下步骤：在移栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件。

更进一步地，所述步骤（3）中的泥炭土和珍珠岩的质量比为4:1。

更进一步地，该方法还包括以下步骤：移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95％，保持叶表面水雾不干。