[发明专利]一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法

权利要求书

1.一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）诱导与分化：取波叶鸟巢蕨根状茎为外植体并进行无菌处理，取经过无菌处理的根状茎切成若干块状并放入MS培养基中进行培养，培养温度为24～26℃，光照1800～2000lux，光照时间为每天12h，培养16～18周时间，可见切口处分化出小颗粒状的原球茎；

（2）无菌苗的增殖培养：取上述原球茎置于MS培养基中，培养3～4周，培养温度为24～26℃，光照2200～2600lux，光照时间为每天12h，每个原球茎分化出3～4个新的原球茎；

（3）无菌苗的移栽驯化：将原球茎置于MS培养基                                               中培养3～4周，每颗原球茎长出1～3棵小苗，再将长出的每棵小苗置于MS培养基中培养3～4周，即进行移栽驯化，洗净无菌苗根部的培养液并移栽进泥炭土和珍珠岩组成的基质内，保持温度为18～28℃，光照5000～7000Lux。

2.根据权利要求1所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（1）中，对波叶鸟巢蕨根状茎进行无菌处理的步骤为：剥干净根状茎外面的叶鞘和毛鳞，用75％的酒精处理10秒，再在0.1％的升汞溶液中浸泡8～10分钟后取出，最后用无菌水冲洗4～5次。

3.根据权利要求1所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（1）中的MS培养基中加入有BA和IAA，MS培养基中的BA的浓度为 0.5～1.5mg/L，IAA的浓度为 1～3mg/L，所述鸟巢蕨根状茎切成的块状长度为0.3cm。

4.根据权利要求1所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（2）中，在所述MS培养基中加入有BA、KT和糖，MS培养基中的BA浓度为 0.2～1.0mg/L、KT的浓度为 0.1～0.5mg/L，糖的浓度为3％。

5.根据权利要求1所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（3）中，在所述MS培养基中加入有活性炭和糖，MS培养基中的活性炭的浓度为2g/L，糖的浓度为3％。

6.根据权利要求5所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（3）中，在所述MS培养基中加入有IBA和糖，MS培养基中的IBA的浓度为1mg/L，糖的浓度为3％。

7.根据权利要求6所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，经过所述MS培养基培养后，每颗原球茎长出的小苗高0.5厘米，在经过所述MS培养基培养后，每颗小苗长成1～1.5厘米高，并有二至三条黑色小须根。

8.根据权利要求7所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，该方法还包括以下步骤：在移栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件。

9.根据权利要求8所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（3）中的泥炭土和珍珠岩的质量比为4:1。

10.根据权利要求8所述的一种波叶鸟巢蕨种苗的组培快繁方法，其特征在于，该方法还包括以下步骤：移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95％，保持叶表面水雾不干。